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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » M13通用引物
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呀薯条

金虫 (小有名气)

[求助] M13通用引物 已有2人参与

我在做塔卡拉公司pMD18T载体的连接，目的基因含有两个酶切位点，上游是BamHI,下游是XhoI,网上查了下M13通用引物有好多种，那我该用哪种啊？求指导，，可以告诉我具体序列更好！
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1楼 2014-04-15 09:49:24
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 呀薯条 at 2014-04-15 12:06:21
那使用这个引物，它Tm温度一般是多少啊？其他步骤的温度就是94,72度就可以了吧...

TM值58-60就可以了，热击温度按照你的酶而定的吧，一般的酶都是94度。
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6楼2014-04-15 12:22:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我这的一组还可以，60度退火，一直都很OK，现在在外面，晚些时候发给你

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-04-15 09:53:24
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-15 11:05:27
M13F(-47)        CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC
M13R(-48)        AGCGGATAACAATTTCACACAGGA
M13F(-77)        GATGTGCTGCAAGGCGATTA
M13R(-88)        TTATGCTTCCGGCTCGTATG
M13F        GTAAAACGACGGCCAG
M13R        CAGGAAACAGCTATGAC
M14F        CGGTCACAGCTTGTCTGTAA
M13-75        GATGCCGGGAGCAGACAAGC
M13-76        GTGAGCGAGGAAGCGGAAGA
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3楼2014-04-15 10:54:48
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-15 11:05:36
呀薯条: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-04-15 12:04:37
一般是用
M13F(-47)        CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC
M13R(-48)        AGCGGATAACAATTTCACACAGGA
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4楼2014-04-15 10:58:22
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