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新虫 (正式写手)

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[求助] 质粒pMD19的测序引物，RV-M 和M13F(-47)指的是质粒什么位置的引物已有3人参与

质粒pMD19的测序引物，RV-M 和M13F(-47)指的是质粒什么位置的引物，它们之间的距离有多少bp碱基，我转化了一段440bp片段的DNA用这两条引物测序，测序结果是1200多bp,pMD19质粒就2697bp了，为什么测序结果那么短，奇怪的是这段序列里面正好包含我的那段DNA序列。

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1楼 2014-02-22 10:57:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 16:01:52
gyesang: 回帖置顶 2014-03-30 16:02:04

这两个引物分别位于你转化片段左右两侧50bp左右。测序的话，你需要的是两测序引物之间的片段，大约550bp。

测序结果是1200多bp的原因在于：当用RV-M测的时候，从该引物开始，一般后续的800-1000 bp是可用的；M13F(-47)亦如是；拼接后大概得到1200bp可用序列，包括目的片段及其左右两端的部分载体序列。