| 查看: 5473 | 回复: 24 | ||||
[求助]
RNA提取，怎么老是降解？求指导！！ 已有6人参与
|
||||
|
最近在提取植物（苜蓿）RNA，用的是博迈德的RNA提取试剂盒，多次提取经过琼胶电泳，条带都很弥散，降解的厉害，求助原因！ 枪头、离心管都是进口的； 4度离心； |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有90人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大家看看我这个革兰氏阳性菌的总RNA提取电泳图是怎么回事
已经有5人回复
- 荧光定量的图，求解释啊
已经有11人回复
- 有关细胞总RNA提取
已经有16人回复
- RNA 提取如何保证质量
已经有17人回复
- RNA 提取注意事项 和心得
已经有9人回复
- RNA降解，求高人分析一下原因。
已经有11人回复
- 动物肌肉提取RNA，为什么看起来18S比28S亮很多？
已经有8人回复
- 提取RNA条带28/18为什么总是不成两倍关系啊？
已经有5人回复
- 提取RNA是直接加Trizol还是胰酶消化后加Trizol？
已经有20人回复
- 急啊，求助提取RNA前，植物叶片采集的问题
已经有20人回复
- 如何用trizol试剂保存RNA提取材料？请各位前辈指点指点，不甚感激！
已经有14人回复
- 种子中RNA的提取
已经有9人回复
- 求助各位大神！帮忙看下，我的RNA提取的怎么样。。。不胜感激！
已经有11人回复
- 【求助/交流】烟曲霉菌提取RNA
已经有11人回复
- 【求助/交流】细菌总RNA的提取和RT-PCR
已经有8人回复
- 【专题】各位看看我提取的ＲＮＡ怎么样啊
已经有24人回复
- 【求助/交流】RNA提的不好，基本都降解的话，逆转录后再PCR会是什么结果？
已经有20人回复
- 【求助/交流】寻高手解答：提取质粒老是降解怎么回事？
已经有12人回复
- 【求助/交流】怎么才能减少RNA提取中RNA 的讲解
已经有15人回复
wanjunfei153
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 160.9
- 散金: 120
- 帖子: 40
- 在线: 77小时
- 虫号: 1099658
- 注册: 2010-09-15
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2014-03-27 12:38:32
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10415.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
6楼2014-03-27 09:40:12
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10415.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
9楼2014-03-27 14:04:35
Hliotrope
木虫 (著名写手)
- 应助: 44 (小学生)
- 金币: 2650.4
- 散金: 200
- 红花: 10
- 沙发: 1
- 帖子: 1304
- 在线: 931.1小时
- 虫号: 2382127
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 药物学
4楼2014-03-27 09:05:28
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10415.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+4, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 22:20:18
gyesang: 回帖置顶 2014-03-31 22:20:25
gyesang: 金币+4, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 22:20:18
gyesang: 回帖置顶 2014-03-31 22:20:25
|
用agarose gel判断total RNA的完整性，最重要的指标是条带的完整性，也就是说，在28S 18S之间，两者的上下方，有没有弥散性的条带，注意是弥散性而不是很sharp的条带，因为这个取决于你的上样量，你要是跑10μg甚至更多的total RNA，这些地方就能看见其他的sharp 条带。一般而言上500 ng足矣。 因为一般跑total RNA不会用很高浓度的胶，1.5%最高了，所以5S和tRNA经常是一个smear状的，1%左右的时候无法区分5S和tRNA，高一点还可以看见5S下方还有一个弥散性的tRNA。这些小RNA因为是smear状的，所以经常显得亮一些。 最后，如果你是跑的EB胶先加到agarose里面的，要注意多跑一会，这个经常出现，不单单是total RNA，个人理解是这些较大的条带还没有充分吸收EB，如果你就跑一会会，肯定是最小的最亮。 |
20楼2014-03-28 07:55:44
2楼2014-03-26 23:39:15
3楼2014-03-27 08:32:51
WAX2010
银虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1977.6
- 散金: 39
- 红花: 5
- 帖子: 208
- 在线: 212.5小时
- 虫号: 1134557
- 注册: 2010-10-29
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
5楼2014-03-27 09:34:43
cgspider
木虫 (正式写手)
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 2264.9
- 散金: 23
- 红花: 3
- 帖子: 495
- 在线: 286.9小时
- 虫号: 1490494
- 注册: 2011-11-14
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
8楼2014-03-27 13:32:40
10楼2014-03-27 14:09:45
30