应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助各位大神！帮忙看下，我的RNA提取的怎么样。。。不胜感激！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/1返回列表
查看: 2222  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

FYCnl

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求助各位大神！帮忙看下，我的RNA提取的怎么样。。。不胜感激！

我要测白头鹎avUCP的基因序列，提了很多次RNA，电泳结果都不好，大神帮忙看下，找下原因，图片见附件。
  主要步骤：

1.        固体组织破碎设备。准备下列装置之一，1)玻璃匀浆器。用高压灭菌蒸馏水洗涤数次。2)研钵。适用于液氮冻存组织的研磨，清洗同玻璃匀浆器。3)组织细胞超声破碎仪器。探头插入装满蒸馏水的试管或烧杯中，开启超声清洗探头30秒至1分钟。4)高速机械匀浆器(Polytron，Tekmar或类似产品)。打开开关，在蒸馏水中清洗分散器头数次。
2.        高压蒸汽30分钟消毒一次性吸头离心管。
3.        DEPC处理的双蒸水。加DEPC到水中至终浓度为0.01% v/v，室温过夜，高压消毒30分钟。用于溶解RNA，配制TE缓冲液和75％乙醇。
4.        普通双蒸水。高压消毒30分钟，用于冲洗器皿，配制琼脂糖凝胶和电泳用缓冲液。注意溶液配制后高压灭菌，但琼脂糖不能高压处理。
5.        冰盒和湿冰。在冰上进行操作有助于减少RNA降解。
6.        异丙醇，氯仿，纯乙醇，分析纯。75％乙醇用高压消毒的蒸馏水配制。
7.        其它用品。电泳槽，双蒸水冲洗。离心机和加样器，无需处理。
8.        戴手套。注意某些实验如提取质粒DNA使用大量RNA酶，为防污染须特别清洗实验器具和实验区域。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-12-18 16:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liaotiantian

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
额 有DNA污染，点样孔附近的条带
降解严重了吧，最亮的貌似是5S咯。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-12-18 19:59:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

通缉要饭

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
污染有点严重哦，DNA还有残留的
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-12-18 20:30:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+3): 热心！ 2011-12-19 17:05:23
组织有没有液氮速冻保存，是不是用TRIZOL，谁说要在冰上操作，反而不好！还有枪头离心管最好用DEPC泡过的，不然就买无核酸酶的。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-12-18 20:51:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
虽然我也比较粗犷，但你也太粗犷了。。。
DEPC处理是浓度是0.1%，0.01%估计太低了；
75%的乙醇你好歹也搞个DEPC水来配置吧，用灭菌蒸馏水及随意了；
特别是溶解RNA的，你随便弄个灭菌就拿来溶解RNA？.......

你baidu一下RNase吧...
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

FYCnl
5楼2011-12-19 09:59:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dovekaoyan

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
最亮是5S的，离加样孔最近的条带是DNA的，所以不是很理想，应该5S前面那两条带比5S亮才好。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-12-19 16:17:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wang7x7x

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
降解的厉害，污染的厉害。提取很失败。


[ Last edited by wang7x7x on 2011-12-20 at 16:08 ]
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-12-20 16:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

FYCnl

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by shaquila at 2011-12-18 20:51:05:
组织有没有液氮速冻保存，是不是用TRIZOL，谁说要在冰上操作，反而不好！还有枪头离心管最好用DEPC泡过的，不然就买无核酸酶的。

组织有液氮速冻保存，用的Trizol，枪头离心管都是买的特质的、专为提RNA用的
赞一下 回复此楼
8楼2011-12-28 11:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

FYCnl

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by longrna at 2011-12-19 09:59:17:
虽然我也比较粗犷，但你也太粗犷了。。。
DEPC处理是浓度是0.1%，0.01%估计太低了；
75%的乙醇你好歹也搞个DEPC水来配置吧，用灭菌蒸馏水及随意了；
特别是溶解RNA的，你随便弄个灭菌就拿来溶解RNA？.......
...

我那边写的有些错误，我用的DEPC处理是浓度是0.1%，70%酒精、溶解RNA的水都是高压过的depc水。
赞一下 回复此楼
9楼2011-12-28 11:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

FYCnl

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by wang7x7x at 2011-12-20 16:04:16:
降解的厉害，污染的厉害。提取很失败。

[ Last edited by wang7x7x on 2011-12-20 at 16:08 ]

你提取的很好啊
回复此楼
10楼2011-12-28 11:57:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jaiminzhang

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你研磨样品的时候加TRIZOL一起磨把，我估计这样的效果好一些
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-12-30 09:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳动的RNA

禁言 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
12楼2012-01-13 10:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 FYCnl 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 小沢 2026-04-03 4/200 2026-04-06 21:34 by barlinike
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 22408 总分320，一篇论文二作，两个国三，求调剂 +3 Leomulufu 2026-04-04 5/250 2026-04-05 19:04 by chongya
[考研] 工科08-机械专硕-求调剂 +3 雷欧飞踢 2026-04-02 3/150 2026-04-05 18:49 by 蓝云思雨
[考研] 284求调剂 +7 徐同学_001 2026-04-04 13/650 2026-04-05 17:19 by yulian1987
[考研] 323求调剂（计算机视觉和大模型项目经历） +3 chaoxiicy 2026-03-31 3/150 2026-04-05 10:33 by zhq0425
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +6 ioodiiij 2026-04-04 6/300 2026-04-05 10:09 by guoweigw
[考研] 考研调剂 +3 mcbbc 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:03 by barlinike
[考研] 本科211 分数293请求调剂 +4 莲菜就是藕吧 2026-04-01 4/200 2026-04-04 22:32 by hemengdong
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 315求调剂 +13 小羊小羊_ 2026-04-02 14/700 2026-04-04 20:30 by 蓝云思雨
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
[考研] 26调剂 086003 +6 失活的细胞 2026-04-04 6/300 2026-04-04 09:50 by zhangdingwa
[考研] 085601一志愿北理325分求调剂 +6 找调剂，， 2026-04-02 6/300 2026-04-03 22:20 by 柟�?
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[考研] 338求调剂，一志愿能源动力，外语是日语203 +5 zzz，，r 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:45 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂22408 288分 +5 new382 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:13 by 醉在风里
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 285求调剂 +14 AZMK 2026-04-02 14/700 2026-04-02 15:54 by 上九天揽月（好�
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭