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Mis_Q

银虫 (小有名气)

[求助] 动物肌肉提取RNA，为什么看起来18S比28S亮很多？

如题，请各位前辈看看是不是降解了还是什么原因，后期做荧光定量可以用嘛？

123.jpg
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1楼 2012-12-20 11:40:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Mis_Q: 金币+1, ★有帮助 2012-12-21 10:43:50
觉得是有降解。样品不是很好，如果还有样品的话最好是重新提。
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2楼2012-12-20 14:35:32
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dayulee

木虫 (正式写手)

愚木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Mis_Q: 金币+3, ★★★很有帮助, 那我就先接着做试试看，谢谢了 2012-12-21 10:43:24
做荧光定量应该还是可以的额。除了5'race对RNA的完整度要求特别高外，一般的RNA实验你这个RNA质量应该是没问题的。
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好好学习，天天向上
3楼2012-12-20 22:18:24
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xk729

木虫 (小有名气)

$$

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Mis_Q: 金币+1, ★有帮助, 非常谢谢 2012-12-21 10:44:56
应该是降解了，再试试，不过做不同试验要求不同，同意3楼的！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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有些路只能是自己走下去，坚持！
4楼2012-12-21 00:22:54
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Mis_Q

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-20 14:35:32
觉得是有降解。样品不是很好，如果还有样品的话最好是重新提。

RNA都快把我提疯了，一直浓度不好，浓度稍好一点，不是有污染就是降解，哎。。
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5楼2012-12-21 10:44:41
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Mis_Q

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dayulee at 2012-12-20 22:18:24
做荧光定量应该还是可以的额。除了5'race对RNA的完整度要求特别高外，一般的RNA实验你这个RNA质量应该是没问题的。

回复的消息好小，再写一遍，准备接着做后面的，如果不行的话再回头重新提取RNA试试看，谢谢了
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6楼2012-12-21 10:46:32
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Mis_Q at 2012-12-21 10:46:32
回复的消息好小，再写一遍，准备接着做后面的，如果不行的话再回头重新提取RNA试试看，谢谢了...

有一定降解的RNA想做定量荧光是可以的。有时候我也用不是太好的样品，不过样品之间的28S/18S/5S最好差不多。不过我看你的各个样品的降解程度不是很一样。这只是rRNA，mRNA就很难说了。
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7楼2012-12-21 13:11:41
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Mis_Q

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-21 13:11:41
有一定降解的RNA想做定量荧光是可以的。有时候我也用不是太好的样品，不过样品之间的28S/18S/5S最好差不多。不过我看你的各个样品的降解程度不是很一样。这只是rRNA，mRNA就很难说了。...

那左面那两个实在不行就不要了，我先找相似的往后做，整体熟悉一下过程好了。
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8楼2012-12-21 15:36:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Mis_Q at 2012-12-21 15:36:58
那左面那两个实在不行就不要了，我先找相似的往后做，整体熟悉一下过程好了。...

我只是凭自己的经验而论。祝实验顺利。
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9楼2012-12-22 07:42:03
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