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Mis_Q

银虫 (小有名气)

[求助] 动物肌肉提取RNA,为什么看起来18S比28S亮很多?

如题,请各位前辈看看是不是降解了还是什么原因,后期做荧光定量可以用嘛?

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Mis_Q: 金币+1, 有帮助 2012-12-21 10:43:50
觉得是有降解。样品不是很好,如果还有样品的话最好是重新提。
2楼2012-12-20 14:35:32
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dayulee

木虫 (正式写手)

愚木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Mis_Q: 金币+3, ★★★很有帮助, 那我就先接着做试试看,谢谢了 2012-12-21 10:43:24
做荧光定量应该还是可以的额。除了5'race对RNA的完整度要求特别高外,一般的RNA实验你这个RNA质量应该是没问题的。
好好学习,天天向上
3楼2012-12-20 22:18:24
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xk729

木虫 (小有名气)

$$

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Mis_Q: 金币+1, 有帮助, 非常谢谢 2012-12-21 10:44:56
应该是降解了,再试试,不过做不同试验要求不同,同意3楼的!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
有些路只能是自己走下去,坚持!
4楼2012-12-21 00:22:54
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Mis_Q

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-20 14:35:32
觉得是有降解。样品不是很好,如果还有样品的话最好是重新提。

RNA都快把我提疯了,一直浓度不好,浓度稍好一点,不是有污染就是降解,哎。。
5楼2012-12-21 10:44:41
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Mis_Q

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dayulee at 2012-12-20 22:18:24
做荧光定量应该还是可以的额。除了5'race对RNA的完整度要求特别高外,一般的RNA实验你这个RNA质量应该是没问题的。

回复的消息好小,再写一遍,准备接着做后面的,如果不行的话再回头重新提取RNA试试看,谢谢了
6楼2012-12-21 10:46:32
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Mis_Q at 2012-12-21 10:46:32
回复的消息好小,再写一遍,准备接着做后面的,如果不行的话再回头重新提取RNA试试看,谢谢了...

有一定降解的RNA想做定量荧光是可以的。有时候我也用不是太好的样品,不过样品之间的28S/18S/5S最好差不多。不过我看你的各个样品的降解程度不是很一样。这只是rRNA,mRNA就很难说了。
7楼2012-12-21 13:11:41
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Mis_Q

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-21 13:11:41
有一定降解的RNA想做定量荧光是可以的。有时候我也用不是太好的样品,不过样品之间的28S/18S/5S最好差不多。不过我看你的各个样品的降解程度不是很一样。这只是rRNA,mRNA就很难说了。...

那左面那两个实在不行就不要了,我先找相似的往后做,整体熟悉一下过程好了。
8楼2012-12-21 15:36:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Mis_Q at 2012-12-21 15:36:58
那左面那两个实在不行就不要了,我先找相似的往后做,整体熟悉一下过程好了。...

我只是凭自己的经验而论。祝实验顺利。
9楼2012-12-22 07:42:03
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