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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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mtz0305

金虫 (小有名气)

[求助] pcr扩出来奇怪的条带 已有3人参与

lz近日做pcr,要扩一条800bpr条带,但是扩了好多次没有扩出来目的条带,但是很奇怪总是在最上边有一条10000多bp的条带,延伸时间才50s呀,怎么会出来这条带呢,现在确认pcr体系,模板都是没有问题的。做了梯度pcr也是一样的结果。试着回收测个序,结果回收两次都回收 不到。附件里用的marker 是10000的。。同行们,帮帮忙,快纠结死了。

pcr扩出来奇怪的条带
huaiiyi4.jpg
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做自己最好!
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

是不是你的模板量加的太多了?
2楼2014-03-20 18:28:40
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mtz0305

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-20 18:28:40
是不是你的模板量加的太多了?

100微升加1微升,扩另一个片段扩出来了。应该不多吧
做自己最好!
3楼2014-03-20 18:50:16
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knightdream

金虫 (初入文坛)

你的模板是什么?
4楼2014-03-20 18:52:00
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mjt2007

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mtz0305(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:24:52
上面这条带肯定是模板,一般PCR肯定也扩不出这么长的条带啊
Theworldisnotinyourbooksandmaps,itisoutthere.
5楼2014-03-20 18:57:21
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-03-20 19:54:00
你模板是不是一万左右,模板加多了,你把模板稀释一千倍再做一次试试
hehe
6楼2014-03-20 19:29:38
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by mtz0305 at 2014-03-20 18:50:16
100微升加1微升,扩另一个片段扩出来了。应该不多吧...

恩  ,我最近遇到的是一样的体系条件,结果扩不出来了,哎。
7楼2014-03-20 20:01:18
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zjuwrx

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mtz0305(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:25:01
感觉是模板的样子,50s的延伸不可能出来这么大的带。另外最好是把模板浓度测一下,虽然只加了1ul,但说不定浓度很高,所以才这么明显
8楼2014-03-20 20:58:25
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mtz0305

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-20 19:29:38
你模板是不是一万左右,模板加多了,你把模板稀释一千倍再做一次试试

谢谢,我试试。不过我的模板是提的基因组,是5M的,有没有是因为是基因组降解了。
做自己最好!
9楼2014-03-21 08:22:26
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