应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 通过梯度PCR摸索的最佳退火温度，扩出来的条带不太亮，帮忙分析那些引物不可以用
61/1返回列表
查看: 2519  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yangmindk

银虫 (初入文坛)

[求助] 通过梯度PCR摸索的最佳退火温度，扩出来的条带不太亮，帮忙分析那些引物不可以用

我是做SSR的，通过对30对引物进行梯度PCR，确定最佳退火温度，但是扩出来的条带依然不清晰，有的还是多条，不知道是非特异性扩增还是不同重复数的片段。用的是4%的琼脂糖凝胶，Marker是20bp，很郁闷啊，还请大家多多指教。

未命名.jpg



未命名.jpg



1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
明天会更好
1楼 2012-11-23 16:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangmindk

银虫 (初入文坛)
怎么没回应呢？郁闷啊
赞一下 回复此楼
明天会更好
2楼2012-11-24 18:40:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

saintoy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你换聚丙烯胶跑跑看，这个也太模糊了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yangmindk
saintoy@163.com
3楼2012-12-03 10:38:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangmindk

银虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by saintoy at 2012-12-03 10:38:08
你换聚丙烯胶跑跑看，这个也太模糊了

嗯，这是PAGE胶跑的图片，12%的胶。帮忙看一下，谢谢哈.这是绵羊的

{9HQ%[]RIYAP`))E%]MYB3L.jpg
赞一下 回复此楼
明天会更好
4楼2012-12-03 12:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

梯度PCR只是在不知道具体退货温度的时候拿来找个大概的温度范围，在确定大概的温度范围之后需要再精确的做单独温度，最终找到一个温度最高（特异性好），产量最高（最适温度）的温度点再来跑PCR，否则你这个没有办法得到很准确的结果，垂直板不就跑成那个样子了嘛。
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-03 16:45:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyc_charles

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个是变性胶嘛？你这个PAGE胶跑的挺好的啊，垂直板跑出来这种的算是比较清楚的了。最下端的那部分不清楚，可以不用管它了。你是做什么，多态性分析么？
赞一下 回复此楼
不但要做一个优秀的人，更要做一个无可取代的人…
6楼2013-07-22 18:55:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangmindk 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 06:43 by l48hFd8Nwae2
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 06:39 by l48hFd8Nwae2
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 15/750 2026-11-09 05:37 by l48hFd8Nwae2
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 21:29 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭