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通过梯度PCR摸索的最佳退火温度，扩出来的条带不太亮，帮忙分析那些引物不可以用
我是做SSR的，通过对30对引物进行梯度PCR，确定最佳退火温度，但是扩出来的条带依然不清晰，有的还是多条，不知道是非特异性扩增还是不同重复数的片段。用的是4%的琼脂糖凝胶，Marker是20bp，很郁闷啊，还请大家多多指教。
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