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米虫的理想

新虫 (初入文坛)

[求助] 目的蛋白沉淀 已有1人参与

原核表达的GST融合蛋白,纯化后用凝血酶酶切,酶切缓冲液是PBS,切后目的蛋白沉淀了,怎么办,沉淀后的蛋白还有活性吗
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
沉淀的蛋白可能不好了,不建议用。
可以尝试在GST柱上切。就是挂柱后,洗干净杂蛋白之后,在柱材内加凝血酶切过夜。第二天来了之后直接让蛋白流出来。这样得到的蛋白不容易沉淀。

希望对你有帮助。
2楼2014-03-13 16:19:19
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