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米虫的理想

新虫 (初入文坛)

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[求助] 目的蛋白沉淀已有1人参与

原核表达的GST融合蛋白，纯化后用凝血酶酶切，酶切缓冲液是PBS，切后目的蛋白沉淀了，怎么办，沉淀后的蛋白还有活性吗

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1楼 2014-03-13 15:30:53

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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

沉淀的蛋白可能不好了，不建议用。
可以尝试在GST柱上切。就是挂柱后，洗干净杂蛋白之后，在柱材内加凝血酶切过夜。第二天来了之后直接让蛋白流出来。这样得到的蛋白不容易沉淀。

希望对你有帮助。

2楼2014-03-13 16:19:19

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