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tongyingjia

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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红花: 1
帖子: 32
在线: 35.6小时
虫号: 1752246
注册: 2012-04-12
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 小片段PCR的问题已有3人参与

我的基因片段长度为324bp，变性温度 94度，30s
                                          退火温度48~58每隔一度设置梯度PCR，30S
                                          延伸温度72度，45s
                                          30个循环
但是PCR结束，跑胶的时候只看到载体的条带，所需要的基因一点都没有p出来，这是为什么呀？求大神解答！！

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1楼2014-03-12 19:57:54

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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

应助: 41 (小学生)
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在线: 119.1小时
虫号: 2468570
注册: 2013-05-17
性别: GG
专业: 作物分子育种

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tongyingjia(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-12 21:26:55
tongyingjia: 金币+4, ★有帮助 2014-03-17 20:06:42

（1）载体构建，除了电击转化效率偏低以外，暂时无出现楼主的案例；

（2）最直接的建议：既然PCR效果不理想，换一种验证思路：酶切验证。

4楼2014-03-12 21:24:32

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