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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助：为什么PCR可以P出来，但是酶切条带不对呢？
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XLC1210

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：为什么PCR可以P出来，但是酶切条带不对呢？ 已有2人参与

如题所示，我是将5个基因与一个载体连接，连接转化后提取的质粒做PCR，可以P出5个基因，但是用酶切验证得到的条带大小与预测的大小不对，其中不存在同尾酶的情况哪位大神可以帮忙解释下怎么回事吗？
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别把我的个性和态度混为一谈，我的个性是源于我是谁，而我的态度则取决于你是谁！
1楼 2014-03-10 19:39:52
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
酶切位点的问题？？？
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做一个阳光、开朗的小和尚
2楼2014-03-10 20:39:06
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XLC1210

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2014-03-10 20:39:06
酶切位点的问题？？？

应该不会啊  依次是EcoRI   KpnI   BamHI  HindIII   SacI  XbaI
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别把我的个性和态度混为一谈，我的个性是源于我是谁，而我的态度则取决于你是谁！
3楼2014-03-10 20:58:32
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by XLC1210 at 2014-03-10 20:58:32
应该不会啊  依次是EcoRI   KpnI   BamHI  HindIII   SacI  XbaI...

是不是酶切位点出现变化了，毕竟是通过pcr操作了。是不是可以直接去测序，很便宜的
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做一个阳光、开朗的小和尚
4楼2014-03-10 21:00:32
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dnvcqw

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-03-11 12:30:24
我也觉得要不直接测个序，序列在那儿不就全说明问题了吗

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-03-10 21:02:27
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-03-11 12:30:32
建议测个序看看，毕竟没有序列结果只是推测。
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hehe
6楼2014-03-10 21:19:19
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20083630zhan

木虫 (正式写手)
我最近也是，菌P能够P出目的条带，但是酶切总是切不出来，还有就是酶切后，质粒的大小都不一样了
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7楼2014-03-11 10:05:49
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