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chs4502金虫 (小有名气)
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求助带酶切位点的引物设计
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我想将我的目的片段连接到PYeS 2载体中，但是我的我的目的片段的GC含量很高，超过了60%。以cDNA为模版的PCR一直跑不出来。希望虫友们帮我设计一对带酶切位点的引物。MCS参照PYeS 2载体。 5端：ATGTGCCAGGGACAGGCAGTCCAGGGTCTGAGGCGCCGGAGTTCATTCTTGAAGCTC…………TGGCTACTGGCACCTATCGTGTGCTGCAGCGCCTGGCAGACGTGGCAGCTGAGGCCTAG3端。 PS：最后不要加保护碱基了，否则引物的Tm就要超标了。 |
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