应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 【求助/交流】引物合成
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
181/2返回列表12下一页
查看: 2839  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

wuyuanqing

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】引物合成 已有10人参与

老板给我设计的引物，共有6条，最长的一条长度为114个碱基，我问过几家公司（上海生工合成不了），都合成不了，请问有谁知哪几家公司可以合成呀？谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-11 15:14:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wuyuanqing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by gbrillia at 2011-04-12 15:10:08:
可是我2010年5月的时候在金斯特合了105的引物啊，不知道你在哪里，但是济南的金斯特是可以的，至少那个时候是可以的。

我在天津。后来老板将引物修改了，109个，送上海生工了。谢谢支持。
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2011-04-13 09:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuyuanqing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-01-15 09:35:49
请问，上海生工设计的引物  发过来是 P6-F1  P6-F2   P6-R1   P6-R2  能看出来那两个是对应的上下游吗。...

你对照一下你自己设计的引物序列不就知道了吗。
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2014-01-16 08:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+5): good 2011-04-11 16:41:29
引用回帖:
Originally posted by wuyuanqing at 2011-04-11 15:14:38:
老板给我设计的引物，共有6条，最长的一条长度为114个碱基，我问过几家公司（上海生工合成不了），都合成不了，请问有谁知哪几家公司可以合成呀？谢谢。

现在引物合成比较好的公司有华大、invitrogen，上海生工的质量凑合，genewiz也有在做，不过114个碱基太长了，应该没有公司会给你合，一般情况下引物长度超过一定值（具体多少不清楚，大概60bp左右吧）每多合一个碱基要多收很多钱，因为在现有技术条件下每增加一个碱基引入突变的几率会成倍的增加，另外因为引物的长度随之带来的引物完整性问题也很严重（越长越容易断吗，呵呵），所以正常情况下114个碱基是可以分成两条引物来合的。
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

永峰1230
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2011-04-11 15:29:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
西瓜(金币+2): 高见！ 2011-04-11 17:49:11
这个引物确实有些大，不过可以分段合成。。。。
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-04-11 15:36:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gbrillia

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
西瓜(金币+2): 感谢交流 2011-04-11 17:49:28
不知道你那里有没有金斯特，济南有的，可以合成长引物
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-04-11 15:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by gbrillia at 2011-04-11 15:44:43:
不知道你那里有没有金斯特，济南有的，可以合成长引物

根据我的了解，genescript才不会下那么大力气给你合114bp的引物
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
5楼2011-04-11 15:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuyuanqing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-04-11 15:29:07:
现在引物合成比较好的公司有华大、invitrogen，上海生工的质量凑合，genewiz也有在做，不过114个碱基太长了，应该没有公司会给你合，一般情况下引物长度超过一定值（具体多少不清楚，大概60bp左右吧）每多合一个 ...

我是个新手，还不大懂，一条引物分成两条引物来合成那在使用时不必连接起来吧？酶切位点会有什么样的变化？谢谢。
赞一下 回复此楼
6楼2011-04-11 16:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
西瓜(金币+3, EPI+1): 长见识了！您的专题不开不行了！ 2011-04-11 17:50:25
引用回帖:
Originally posted by wuyuanqing at 2011-04-11 16:31:38:
我是个新手，还不大懂，一条引物分成两条引物来合成那在使用时不必连接起来吧？酶切位点会有什么样的变化？谢谢。

比如你的这条114bp的引物咱们分成A，B两条来合成，假设是设计正向引物，A在B前面，那么在引物设计的时候你要使A引物的3’端与B引物的5'端有一段序列的重合（即overlap），一般15bp就可以了。这样先拿B和反向引物扩增得到第一轮产物，以此为模板再用A和反向引物扩增就得到你要的片段了。酶切位点放在引物的5‘端，前面加4-5个碱基当做保护碱基即可。有问题再交流，祝你好运
赞一下(2人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
7楼2011-04-11 17:19:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-04-11 17:19:45:
比如你的这条114bp的引物咱们分成A，B两条来合成，假设是设计正向引物，A在B前面，那么在引物设计的时候你要使A引物的3’端与B引物的5'端有一段序列的重合（即overlap），一般15bp就可以了。这样先拿B和反向引物 ...

overlap PCR
回复此楼
千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
8楼2011-04-11 20:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tzq2011

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
西瓜(金币+3): 鼓励新虫参与交流 2011-04-11 22:50:34
可以问问百奇生物能不能做，在这一块百奇目前做得也不错。
赞一下(2人) 回复此楼
不断获取信息不断更新思维
9楼2011-04-11 20:29:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuyuanqing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-04-11 17:19:45:
比如你的这条114bp的引物咱们分成A，B两条来合成，假设是设计正向引物，A在B前面，那么在引物设计的时候你要使A引物的3’端与B引物的5'端有一段序列的重合（即overlap），一般15bp就可以了。这样先拿B和反向引物 ...

谢谢！
回复此楼
10楼2011-04-11 21:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wuyuanqing 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +4 maverick^_^ 2026-04-03 4/200 2026-04-05 19:08 by 蓝云思雨
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +8 梁富贵险中求 2026-04-04 8/400 2026-04-05 18:01 by 猪会飞
[考研] 282求调剂 +3 aaa车辆 2026-04-01 3/150 2026-04-05 17:03 by yulian1987
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 5/250 2026-04-05 15:52 by jndximd
[考研] 求调剂，一志愿郑州大学材料与化工专硕，英二数二342分，求老师收留 +18 v12abo 2026-04-02 20/1000 2026-04-05 11:37 by a8144223
[考研] 材料调剂 +15 一样YWY 2026-04-01 15/750 2026-04-04 22:23 by hemengdong
[考研] 一志愿华北电力大学（北京），材料科学与工程学硕265，求调剂 +11 yelck 2026-04-03 12/600 2026-04-04 19:52 by dongzh2009
[考研] 一志愿沪9，求生物学调剂，326分 +6 刘墨墨 2026-04-04 6/300 2026-04-04 19:44 by 唐沐儿
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 266分，求材料相关专业调剂 +13 哇呼哼呼哼 2026-03-30 15/750 2026-04-03 15:24 by arrow8852
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 0705理学294求调剂 +3 成果成果cg5 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:04 by simons1972
[考研] 专硕085601求调剂 +7 suyifei 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:00 by 欣喜777
[硕博家园] 求老师收留 +9 lllq123 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:48 by 呼吸都是减肥
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 120+4 Yishengeryi 2026-03-30 6/300 2026-04-02 17:19 by Yishengeryi
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 326求调剂 +4 崽崽仔 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:58 by 我的船我的海
[考研] 085601英二数二求调剂 总分325 +4 余航航 2026-03-31 4/200 2026-03-31 17:38 by 唐沐儿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭