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chs4502

金虫 (小有名气)

[求助] 求助带酶切位点的引物设计

我想将我的目的片段连接到PYeS 2载体中,但是我的我的目的片段的GC含量很高,超过了60%。以cDNA为模版的PCR一直跑不出来。希望虫友们帮我设计一对带酶切位点的引物。MCS参照PYeS 2载体。
5端:ATGTGCCAGGGACAGGCAGTCCAGGGTCTGAGGCGCCGGAGTTCATTCTTGAAGCTC…………TGGCTACTGGCACCTATCGTGTGCTGCAGCGCCTGGCAGACGTGGCAGCTGAGGCCTAG3端。
PS:最后不要加保护碱基了,否则引物的Tm就要超标了。
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review

银虫 (著名写手)

以其他的DNA为模板可以吗
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2楼2012-09-27 12:46:01
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