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misszwh

银虫 (小有名气)

[求助] QPCR扩增曲线异常 已有7人参与

我有对引物,普通PCR并电泳检测,条带很亮,大小也是我需要的,到了QPCR上,溶解曲线正常,扩增曲线很奇怪,没有CT值,你们遇到过吗?什么原因啊?金币不多啊,悬赏有限啊谢谢
QPCR扩增曲线异常
amplication plot.jpg


QPCR扩增曲线异常-1
melt curve.jpg
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

...
    Melt curve中的值太低,绝度不是需要的扩增产物,引物二聚体的可能很大。你如果觉得有疑问,大可拿此产物跑2~3%的琼脂糖胶看一下,看看分子量大小。
    如有说错,请高手指正
Let God do with it as He wills
10楼2014-02-23 02:10:20
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