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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 双酶切问题~ 已有5人参与

双酶切进行转化后,铺板,为什么长满了整个板,都是菌,而且菌落之间模糊不清,不是稀落的像星星一样的,求解释
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huangrui1988

铜虫 (小有名气)


污染了。。。。。
2楼2014-02-17 21:59:39
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永远一片天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huangrui1988 at 2014-02-17 21:59:39
污染了。。。。。

可是,为什么会污染呢,大概是哪一步呢
3楼2014-02-18 08:51:13
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huangrui1988

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 永远一片天 at 2014-02-18 08:51:13
可是,为什么会污染呢,大概是哪一步呢...

感受态或者是涂布的时候加的抗生素不够多。
4楼2014-02-18 10:31:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转化时做对照了吗?
5楼2014-02-18 10:56:03
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hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-18 11:45:45
这个感觉像是宿主细胞都长出来了,用宿主细胞在抗性平板上检查一下,是否抗生素失效或者宿主细胞有问题。
6楼2014-02-18 11:21:44
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
严重怀疑酶切反应时间不够长,存在没有被酶切到的完整质粒。
7楼2014-02-18 14:08:29
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forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感受态的问题,不是其他的问题!
8楼2014-02-18 14:14:43
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的质粒没有切开,导致转化的不是重组质粒而是载体的那个质粒。这种可能性最大。
污染的话,那就是板上有至少2种形态的菌才对。
9楼2014-02-18 17:01:37
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