24小时热门版块排行榜    

查看: 1647  |  回复: 8

nietiantt

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR引物设计 已有3人参与

准备做荧光定量pcr,从组织中提取总RNA后反转录。
通过在NCBI查找,只能找到mRNA序列,找不到cDNA序列。
看有些提问回答说mRNA序列与cDNA序列相同,但是他们不是互补的吗?

我要设计引物应该以什么为模板。mRNA可以吗?
还是应该以什么为模板。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-01-06 12:37:47
确切的说,你找到的是有义链的序列,对应的就是mRNA序列,设计引物就是拿该序列作为模板的
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-01-06 11:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveerobin

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
公司里不是给设计吗
3楼2014-01-06 15:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiliyusly

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-07 10:15:39
genbank上传的序列是mRNA也就是正义链,用mRNA设计引物没有问题的
4楼2014-01-06 19:03:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nietiantt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-01-06 11:25:06
确切的说,你找到的是有义链的序列,对应的就是mRNA序列,设计引物就是拿该序列作为模板的

用RNA反转录得到的cDNA不是和mRNA是互补的吗?
根据mrna设计引物还能好使吗?
5楼2014-01-08 10:58:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nietiantt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by loveerobin at 2014-01-06 15:00:19
公司里不是给设计吗

亲,哪家公司?
6楼2014-01-08 10:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nietiantt

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shiliyusly at 2014-01-06 19:03:28
genbank上传的序列是mRNA也就是正义链,用mRNA设计引物没有问题的

用RNA反转录得到的cDNA不是和mRNA是互补的吗?
根据mrna设计引物还能好使吗?
7楼2014-01-08 10:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveerobin

木虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by nietiantt at 2014-01-08 10:58:54
亲,哪家公司?...

给你发消息吧
当时我们做的时候,就是你发给他序列,引物免费给你设计
8楼2014-01-08 11:34:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiliyusly

新虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-08 19:08:58
引用回帖:
7楼: Originally posted by nietiantt at 2014-01-08 10:59:42
用RNA反转录得到的cDNA不是和mRNA是互补的吗?
根据mrna设计引物还能好使吗?...

以mRNA设计的上游和下游引物对应cDNA就是下游和上游引物,最终PCR产物是以上下游引物为2端的双链DNA,所以我认为设计引物所用的模板是mRNA还是CDNA不重要,个人见解
9楼2014-01-08 13:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nietiantt 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +12 enenenhui 2026-03-13 13/650 2026-03-16 08:30 by Linda Hu
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 293求调剂 +5 上班不着吉 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:37 by JourneyLucky
[考研] 求调剂! +4 朔朔话 2026-03-09 4/200 2026-03-14 01:38 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 工科,求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
信息提示
请填处理意见