应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR引物设计
91/1返回列表
查看: 2012  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nietiantt

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR引物设计 已有3人参与

准备做荧光定量pcr，从组织中提取总RNA后反转录。
通过在NCBI查找，只能找到mRNA序列,找不到cDNA序列。
看有些提问回答说mRNA序列与cDNA序列相同，但是他们不是互补的吗？

我要设计引物应该以什么为模板。mRNA可以吗？
还是应该以什么为模板。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-01-06 09:58:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-01-06 12:37:47
确切的说，你找到的是有义链的序列，对应的就是mRNA序列，设计引物就是拿该序列作为模板的
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-01-06 11:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveerobin

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
公司里不是给设计吗
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-06 15:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiliyusly

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-07 10:15:39
genbank上传的序列是mRNA也就是正义链，用mRNA设计引物没有问题的
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-06 19:03:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nietiantt

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-01-06 11:25:06
确切的说，你找到的是有义链的序列，对应的就是mRNA序列，设计引物就是拿该序列作为模板的

用RNA反转录得到的cDNA不是和mRNA是互补的吗？
根据mrna设计引物还能好使吗？
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-08 10:58:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nietiantt

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by loveerobin at 2014-01-06 15:00:19
公司里不是给设计吗

亲，哪家公司？
回复此楼
6楼2014-01-08 10:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nietiantt

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shiliyusly at 2014-01-06 19:03:28
genbank上传的序列是mRNA也就是正义链，用mRNA设计引物没有问题的

用RNA反转录得到的cDNA不是和mRNA是互补的吗？
根据mrna设计引物还能好使吗？
赞一下 回复此楼
7楼2014-01-08 10:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveerobin

木虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by nietiantt at 2014-01-08 10:58:54
亲，哪家公司？...

给你发消息吧
当时我们做的时候，就是你发给他序列，引物免费给你设计
赞一下 回复此楼
8楼2014-01-08 11:34:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiliyusly

新虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-08 19:08:58
引用回帖:
7楼: Originally posted by nietiantt at 2014-01-08 10:59:42
用RNA反转录得到的cDNA不是和mRNA是互补的吗？
根据mrna设计引物还能好使吗？...

以mRNA设计的上游和下游引物对应cDNA就是下游和上游引物，最终PCR产物是以上下游引物为2端的双链DNA，所以我认为设计引物所用的模板是mRNA还是CDNA不重要，个人见解
赞一下 回复此楼
9楼2014-01-08 13:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nietiantt 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 12/600 2026-08-21 19:46 by kulium
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +3 羊腰板 2026-08-21 3/150 2026-08-21 19:42 by kulium
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 19/950 2026-08-21 18:54 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭