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wzc4884

金虫 (正式写手)

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[求助] 求助荧光定量引物验证？

大家好，最近做了关于荧光定量PCR的文章，在做荧光定量PCR的时候，设计了一个引物，审稿人提出意见说建议我重新设计引物，也就是怀疑我的引物有问题。我不解的是，我做熔解曲线是单峰，而且通过电泳和熔解曲线都说明，引物特异性很好啊（只是文章中我没有将熔解曲线的图附上），我为了验证引物的特异性，我又对PCR产物进行测序分析，比对结果发现，与目的序列的同源性很高。我想使用熔解曲线和测序结果可以回答审稿人问题了吗？谢谢大家赐教！

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1楼 2013-07-14 23:56:56

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

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wzc4884(myprayer代发): 金币+1, Gifts of roses, there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-07-15 10:45:48

你先仔细检查一下审稿人为什么说你的引物不行，需要重新设计。如果的确是怀疑引物的特异性，你自己确定引物没有问题，可以用熔解曲线和测序结果来回答审稿人的问题。