24小时热门版块排行榜    

查看: 1685  |  回复: 8

yutaoweiwei

新虫 (初入文坛)

[求助] 哪位大侠能帮忙设计荧光定量引物

物种:玉米
内参actin          sense      GTTGGGCGTCCTCGTCA
        antisense   TGGGTCATCTTCTCCCTGTT
退火温度60
小女子新手,之前设计过N对引物,终于有一个P出来了,测序结果也对,但是不知为什么,时而P出来,时而P不出来,到最后根本不出来了,郁闷!而且荧光定量的曲线也不好,峰值也不好,后来有人说引物需要跨内含子设计,我的引物没有跨内含子,小女子实在是设计不了了,恳请哪位大侠帮忙看看,感激涕零!!!

基因信息见附件,为预测的,其中CDS区以验证,含有两个外显子,一个内含子,中间黄色的三个碱基为第一个外显子后三个碱基。

本人新虫,还请各位大侠不要嫌金币少,帮帮忙,在线等。。。。。。。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yutaoweiwei

新虫 (初入文坛)

自己顶,加油
2楼2012-11-05 18:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiweigucao

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上罗氏网站上设计,网站忘了
3楼2012-11-06 08:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你给的序列,看不太懂,最后是不是exon2的氨基酸序列?
coasttocoast。
4楼2012-11-06 09:03:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yutaoweiwei

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tupac225 at 2012-11-06 09:03:49
你给的序列,看不太懂,最后是不是exon2的氨基酸序列?

后面是CDS区的氨基酸序列
5楼2012-11-06 16:23:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yutaoweiwei

新虫 (初入文坛)

各位大侠嫌太简单,不愿费事吗
6楼2012-11-07 08:09:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yutaoweiwei

新虫 (初入文坛)

7楼2012-11-08 20:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ivarain

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

http://tools.invitrogen.com/cont ... amp;icid=fr-oligo-6
这个网站上直接可以根据需要得到你需要的引物,而且能保证设计的引物退火温度都大约在60度左右
8楼2012-11-09 09:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuan6126

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不要给出内参基因的引物序列,这样会使得设计者不得不考虑内参的退火温度,这些要同时设计,在同一个退火温度下,有个软件叫bencon designer,专用来定量引物设计
9楼2012-11-11 11:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yutaoweiwei 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +10 Ldrop2023 2026-08-13 10/500 2026-08-17 09:59 by 小豌豆_发芽
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 3/150 2026-08-17 09:49 by xLVPIRuSvCUe
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见