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wangmiao1112超级版主
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蛋白电泳没带 已有4人参与
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最近做蛋白电泳，做了三次都没带，大家给分析分析。我是想自己纯化一下实验室买的粗酶粉。 1、取粗酶粉充分溶解后，10000rpm离心20分钟，弃下层沉淀。 2、取上清液加硫酸铵盐析，取一定体积缓冲液将下层沉淀蛋白溶解 3、脱盐柱脱盐处理。 4、测蛋白浓度4.5mg/ml 然后取20ul 加5ul上扬缓冲液，煮沸5分钟。跑sds-page，marker跑的很好，可是蛋白条带没有。自己做了两次，让别人带了一次都没有条带。请大家给分析分析问题出现在哪了 |
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你是否把酶粉充分溶解了？商品化的酶粉应该没有问题。你可以试试直接跑一下粗酶粉，是否有条带。你纯化的各个步骤要记录回收率，保存各个组分，便于分析问题出在哪里。 |
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wangmiao11126楼2013-12-23 23:01:38
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