| 查看: 1233 | 回复: 8 | |||
wangmiao1112铁虫 (小有名气)
|
[求助]
蛋白电泳没带 已有4人参与
|
|
最近做蛋白电泳，做了三次都没带，大家给分析分析。我是想自己纯化一下实验室买的粗酶粉。 1、取粗酶粉充分溶解后，10000rpm离心20分钟，弃下层沉淀。 2、取上清液加硫酸铵盐析，取一定体积缓冲液将下层沉淀蛋白溶解 3、脱盐柱脱盐处理。 4、测蛋白浓度4.5mg/ml 然后取20ul 加5ul上扬缓冲液，煮沸5分钟。跑sds-page，marker跑的很好，可是蛋白条带没有。自己做了两次，让别人带了一次都没有条带。请大家给分析分析问题出现在哪了 |
回复此楼» 猜你喜欢
材料调剂
已经有3人回复
-
考研调剂
已经有5人回复
-
26申博
已经有4人回复
-
调剂申请
已经有7人回复
-
环境工程297分求调剂一志愿杭高院
已经有8人回复
-
070300化学调剂
已经有7人回复
-
一志愿085600中科院宁波所276分求调剂
已经有15人回复
-
288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行
已经有22人回复
-
273求调剂
已经有8人回复
-
267求调剂
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 绿色荧光蛋白SDS-PAGE电泳条带分析
已经有5人回复
- SDS-page 原核表达蛋白 电泳条带弥散
已经有6人回复
- SDS-PAGE还原与非还原电泳条带一样能说明该蛋白只有一个亚基吗
已经有6人回复
- 蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳没有条带
已经有7人回复
- 关于蛋白电泳染色
已经有4人回复
- 跪求：蛋白质电泳条带老是跑不开去怎么办
已经有14人回复
- 蛋白质电泳条带变窄
已经有8人回复
- 蛋白电泳相关问题求教
已经有11人回复
- 胶原蛋白的电泳为什么跑不出来？
已经有21人回复
- 做电泳时蛋白条带出不来？
已经有19人回复
- 蛋白电泳——毒性
已经有15人回复
- 毕赤表达一酶基因，跑蛋白电泳只有一条带，是不是不用纯化了呀
已经有10人回复
- SDS-Page电泳没有条带，都是黑黑的一片，请教原因
已经有9人回复
- 蛋白电泳，第二向，溴酚蓝不是一条线，有两个向上的凸起，是什么原因造成的啊
已经有5人回复
- 蛋白电泳脱色后一条带都没有，求助各位大神~~~
已经有6人回复
- 了解蛋白质性质及其熟悉电泳的高手请进！
已经有11人回复
- SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移
已经有12人回复
- 蛋白电泳 时间变短 条带异常
已经有18人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有23人回复
- SDS-PAGE 我的样品没有跑出条带，请教高手！谢谢！
已经有7人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳条带问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】sds蛋白质电泳--电流变小，几个跑样带“一”字形下来
已经有12人回复
- 【求助】请问蛋白电泳的原料应该怎么处理？
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白电泳过程中，为何会出现弥散状？
已经有12人回复
2楼2013-12-22 21:22:14
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 4
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
3楼2013-12-23 06:48:57
wangmiao1112
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 8.1
- 红花: 1
- 帖子: 219
- 在线: 96.4小时
- 虫号: 1325191
- 注册: 2011-06-17
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
4楼2013-12-23 12:15:57
wangmiao1112
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 8.1
- 红花: 1
- 帖子: 219
- 在线: 96.4小时
- 虫号: 1325191
- 注册: 2011-06-17
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2013-12-23 12:19:08
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 4
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-12-24 18:05:13
silicare: 应助指数+1 2013-12-24 18:05:18
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-12-24 18:05:13
silicare: 应助指数+1 2013-12-24 18:05:18
|
你是否把酶粉充分溶解了？商品化的酶粉应该没有问题。你可以试试直接跑一下粗酶粉，是否有条带。你纯化的各个步骤要记录回收率，保存各个组分，便于分析问题出在哪里。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
wangmiao11126楼2013-12-23 23:01:38
wangmiao1112
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 8.1
- 红花: 1
- 帖子: 219
- 在线: 96.4小时
- 虫号: 1325191
- 注册: 2011-06-17
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
7楼2013-12-24 14:37:16
8楼2014-01-28 14:38:14
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19480.9
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6591
- 在线: 2779.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
9楼2014-01-30 21:33:05
10