应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR溶解曲线问题
51/1返回列表
查看: 5941  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zzl2516

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR溶解曲线问题已有4人参与

本人做荧光定量PCR，做标曲是5倍稀释了5个点，用的是两步法，95度15s，63度1分钟，但是标曲后两个点也就是浓度低的两个点总是有杂峰，不知道应该怎么调整反应条件，求大神指导
荧光定量PCR溶解曲线问题
这是5个点的溶解曲线
荧光定量PCR溶解曲线问题-1
荧光定量PCR溶解曲线问题-2
这是后两个点的溶解曲线
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-12-16 08:56:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

president114

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

模板调成 150 ng/ul，你可以把稀释倍数换一下 1 4 16 64 256，,5倍稀释最后几个基本上就检测不到了~
赞一下 回复此楼
行路难多歧路
5楼2014-04-28 11:03:36
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

zzl2516

金虫 (小有名气)
没人回我。。自己顶一顶。。。
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-17 10:48:25
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011210200

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-18 08:57:13
个人觉得，应该不是反应条件的问题，问题可能出在引物设计、和PCR体系配制的污染上。从你的溶解曲线上看，有很多峰值，说明有非特异性扩增或是大量的引物二聚体形成。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-12-17 20:00:54
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jennifermatt

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

学习一下。我只遇到过一个杂峰的情况
赞一下 回复此楼
求是
4楼2013-12-26 09:17:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭