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zzl2516

金虫 (小有名气)

应助: 12 (小学生)
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虫号: 1339509
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专业: 环境生物物理

[求助] 荧光定量PCR溶解曲线问题已有4人参与

本人做荧光定量PCR，做标曲是5倍稀释了5个点，用的是两步法，95度15s，63度1分钟，但是标曲后两个点也就是浓度低的两个点总是有杂峰，不知道应该怎么调整反应条件，求大神指导

荧光定量PCR溶解曲线问题

这是5个点的溶解曲线

荧光定量PCR溶解曲线问题-1

荧光定量PCR溶解曲线问题-2

这是后两个点的溶解曲线

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1楼2013-12-16 08:56:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

你是路人甲

铜虫 (小有名气)

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专业: 微生物遗传育种学

【答案】应助回帖

溶解曲线是为了观察我们扩增发出荧光的片段是不是我们需要的产物。我们用BIOG荧光定量PCR盒子检测了DNA,如果溶解曲线做出来只有单峰，且出锋位置是你的退火温度，那么这个是你的产物发出的荧光，实验结果表示有效。

9楼2020-02-18 11:18:46

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