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金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR扩增曲线分析

做的是荧光定量PCR检测土壤中假单胞菌的数量，标准曲线很成功，3个9，扩增效率0.91，于是上样品测定，结果得到如图的扩增曲线图，也得到了CT值，CT值基本在20—25之间，溶解曲线基本上是单峰，但是扩增曲线怎么到后期都会下降呢？这样得到的CT值是否可信？请各位大神帮忙分析分析原因嘛！

扩增曲2.png

溶解曲线2.png

1楼 2013-11-13 19:45:29

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木虫 (小有名气)

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2011210200: 金币+5, ★有帮助 2013-11-15 10:51:21

可能是你的盖子不紧，成分挥发导致的。

求是

3楼2013-11-15 10:48:45

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至尊木虫 (著名写手)

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-15 10:29:57
2011210200: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-11-15 10:51:07

楼主的ct值和溶解曲线都还不错，但扩増曲线到平台期后曲线下降严重，不知道楼主的扩増程序是怎么样的，退火和延伸是同个温度还是不一样，如果不一样，看看能不能缩短延伸时间

[ 发自小木虫客户端 ]

2楼2013-11-15 09:10:42

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