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2011210200

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR扩增曲线分析

做的是荧光定量PCR检测土壤中假单胞菌的数量,标准曲线很成功,3个9,扩增效率0.91,于是上样品测定,结果得到如图的扩增曲线图,也得到了CT值,CT值基本在20—25之间,溶解曲线基本上是单峰,但是扩增曲线怎么到后期都会下降呢?这样得到的CT值是否可信?请各位大神帮忙分析分析原因嘛!
荧光定量PCR扩增曲线分析
扩增曲2.png


荧光定量PCR扩增曲线分析-1
溶解曲线2.png
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lf6220

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-15 10:29:57
2011210200: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-11-15 10:51:07
楼主的ct值和溶解曲线都还不错,但扩増曲线到平台期后曲线下降严重,不知道楼主的扩増程序是怎么样的,退火和延伸是同个温度还是不一样,如果不一样,看看能不能缩短延伸时间

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-11-15 09:10:42
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jennifermatt

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
2011210200: 金币+5, 有帮助 2013-11-15 10:51:21
可能是你的盖子不紧,成分挥发导致的。
求是
3楼2013-11-15 10:48:45
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