24小时热门版块排行榜

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR扩增曲线分析

做的是荧光定量PCR检测土壤中假单胞菌的数量，标准曲线很成功，3个9，扩增效率0.91，于是上样品测定，结果得到如图的扩增曲线图，也得到了CT值，CT值基本在20—25之间，溶解曲线基本上是单峰，但是扩增曲线怎么到后期都会下降呢？这样得到的CT值是否可信？请各位大神帮忙分析分析原因嘛！

扩增曲2.png

溶解曲线2.png

1楼 2013-11-13 19:45:29

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-15 10:29:57
2011210200: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-11-15 10:51:07

楼主的ct值和溶解曲线都还不错，但扩増曲线到平台期后曲线下降严重，不知道楼主的扩増程序是怎么样的，退火和延伸是同个温度还是不一样，如果不一样，看看能不能缩短延伸时间

[ 发自小木虫客户端 ]

2楼2013-11-15 09:10:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
2011210200: 金币+5, ★有帮助 2013-11-15 10:51:21

可能是你的盖子不紧，成分挥发导致的。

求是

3楼2013-11-15 10:48:45

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 2011210200 的主题更新