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我在网上搜了下，都是讲软件的使用和引物设计的原则的，现在我有些基本的问题搞不清楚，想请教下大家。如果知道想扩增的序列，还需要找到这段学列两边的序列才能设计出引物吗？如果设计未知序列的引物又该怎么办？我的目的是要设计一个基因的通用引物，具体做法是把这个基因的所有序列都下载下来，然后做比对，拿保守区域直接作为引物来用吗？本人刚开始做的菜鸟，希望亲们能详细一些，不胜感激！

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1楼 2013-11-11 18:39:05

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liu2883508

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楼主如果是用未知序列没法设计引物的，如果你做的材料不知道序列，可以用它的近缘的物种，如单子叶参考水稻，双子叶参考拟南芥，或者参考模式植物的序列，如水稻，拟南芥，玉米，烟草等，不知道你的通用引物的目的是什么，如果只是扩增全长，就不在保守区域，如果是做表达，那就应该也不在保守区域~应该是该基因区别于其他所有基因的特异序列部分~

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人生就是要不断的前进，忘掉不好的，记住好的向前行

3楼2013-11-12 11:14:05

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simian1992

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应该就是用保守区的基因序列来设计引物吧。

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2楼2013-11-12 09:48:22

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引用回帖:

3楼: Originally posted by liu2883508 at 2013-11-12 11:14:05
楼主如果是用未知序列没法设计引物的，如果你做的材料不知道序列，可以用它的近缘的物种，如单子叶参考水稻，双子叶参考拟南芥，或者参考模式植物的序列，如水稻，拟南芥，玉米，烟草等，不知道你的通用引物的目的是 ...

是想把不同物种的同一基因一次扩增出来，用来做条形码的

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4楼2013-11-12 14:43:15

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