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残刀无痕

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：农杆菌菌液PCR无阳性

我用大肠杆菌质粒电转农杆菌感受态！由于是第一次，转化的过程中不小心复苏时放在37度摇床摇了1h，然后涂皿。两天多之后才长了斑，师兄说转农杆菌阳性率高，所以只挑了4个斑，然后又在37度摇了7h，之后才放入28度摇床，摇了12h后吸菌液pcr检测，无带。然后再挑6个，28度摇12h，检测时加上前面的4个一起，还是无带。设置的大肠杆菌质粒对照都有带！pcr体系:mix 8ul,引物各0.5ul，菌液1ul，跑的普通的scar程序！
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1楼 2013-11-05 22:50:48
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