应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助~~~~大肠杆菌内质粒会不会自行发生同源重组？
51/1返回列表
查看: 4428  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liondolphin

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助~~~~大肠杆菌内质粒会不会自行发生同源重组？

现在在构建质粒，使用的菌株是大肠杆菌BL21（DE3），DH5a，在质粒上加了三段终止子，都是一样的，大约400+bp，话说它们会不会发生同源重组呀，求高手解答~~~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-05 11:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljy241

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gastrodia at 2013-11-05 18:04:04
有可能，即使是重组酶缺失的菌株也存在同源重组的情况，我们在实验中就成功地使用DH5a进行同源重组，

我也发现用DH5a会发生重组，虽然概率比较低。
我现在构建的一个质粒里面有三对重复序列，长度分别约300bp, 500bp, 1kb. 鉴定连接产物时，用菌液pcr看两个接口是否正确，菌液摇几个小时还是清澈的，不过pcr能出来，而且有很多阳性克隆。摇过夜能看到细菌，但我怀疑长出来的是杂菌，因为质粒抽不出来。
现在这个载体都构建半年多了，一直是这个问题，菌液pcr鉴定正确，就是提不出质粒，请高手指点下是怎么回事。我是怀疑把氨苄抗性基因的启动子破坏了，或者是复制子重组掉了。
赞一下 回复此楼
8楼2014-02-21 12:58:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

lvshilu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liondolphin: 金币+1 2013-11-07 11:00:27
不会吧，好像没有回文序列吧？重组往哪插入啊？
赞一下 回复此楼
需要金币
3楼2013-11-05 15:11:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liondolphin

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lvshilu at 2013-11-05 15:11:28
不会吧，好像没有回文序列吧？重组往哪插入啊？

不会就太好了~就最近刚开始看同源重组的文献，觉得有三段400bp的同源序列会不会把三个之间的序列通过同源重组给调换位置
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-05 16:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liondolphin: 金币+1 2013-11-07 11:00:19
不会，DH5α和Top10都是rec缺陷型菌株
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-11-05 17:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 10:52 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 4/200 2026-11-15 09:57 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:18 by xSrQNSSjcgoX
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 02:48 by xSrQNSSjcgoX
[文学芳草园] 厉娜 +4 张丹枫1991 2026-11-09 6/300 2026-11-15 00:48 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 10/500 2026-11-15 00:39 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 8/400 2026-11-14 22:20 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-13 11:08 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-13 11:04 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 13:02 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:14 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:08 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭