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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 紧急求助关于PCR
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heroxuning

木虫 (正式写手)

[求助] 紧急求助关于PCR

各位大神，给定目的序列和引物序列，怎样来设计确定PCR程序？小弟在线等，多谢啦模板序列
（目的基因）：
atcggtacttcgcgaatgcgtcgagatGCGGCCGCgaattctttaacatcccgactgctaccctttatgagtcccacatttattttatacatgtatttaaggttttaatgggaacaacgtatttggtaaaatgaaaaaaaaaaggattatgagtgtggtacaatattatacatatattaaagttagtaatactagattagtcaagagattgttagtctagatcacttacatttttatgcttacaaattatttaataaagtgcttaaataaaacataaatgtgcatttcatattttacctatgcgagtaattgtataaattcatttgtggcttgattagattatcttcttattcaatctactaattcaccttaatcaccaatcttatgctcatctaaaagacaattcactaatcatcatgttaacacaaagcaattggttaaatacttggttaatcatgataatgagatggatagatgaagatatttaagatcaacataagtacttagaagttcaatagaaaaaaatatatacagtgtattaagaaatctcaagaggttagttcgatctctctaaaacaaatcttagtctcatcattaggtttttaagactatttatagtaaaggctaaaagagtttggttaatatgcaataaaccaaatcaaacccgagacaaaccggtaaccaatataaaatctcataaaattgaggactccatcagtggtgatgaagtcgctatggatgttcggtgctgcccatctgtctacctgataccgctacaattccttcctgccttccatcggtctacgttagcccgctacatatgctcgcttgaaatcttggtaaatctagagtatcatcatcgcagccaacctcatcccactacaaatgcttgctgctgtccatcggtcttgttaaaacattacaaatgcccgatgactcccattgacctacaaaagcccgctgcatctccccttctgcatttcaatgtctttccgatgagtgtgtcgcggttgacacgagcccgctatatgatccttataacgtccattgaccaacatgaaccgctatgactcctccgtgacattcctccttcagcaaatctactcaaatggctccattttgcctcctttgatcaccatttcacccaatcctcttcaagacctataaataccaatgcatatgtaaatatacaactaaaaccctatatgaattatgcaaatgaatcaaaagtgaaacaaaacaagattataaggatggtaaaattgatagatattaataggctattaatgtaaaacacatgatgttttggttcaaacaattcaccgaacaccttccggaataaaattgtctaagtcataaactagcattttaaagctaatctagcattaataccacatatcattaaaagactaaaaattctatttacctttaatctaccattcccaagagtttctaacaaacaaggttgacatttggctaatcatgatttgtaagagaatagttgaaaattttgaaaaggaaaagagatttagtaactgaaaataaataattcatacaagttctctttaaatcttcacaagaggcaaatataattctaaaaatctaatttagaacatcaaaataagatttaaagatataaatagtaaatagatgtgtcatgattcattcgagacaaatcggtttggatccaagcaaagaacttccggagtcacgcatggcagtgagctttggtggtcagttggccaattttcggtggaactactggttaggcatgcataatttgttttttttttttttgtatgaaaactctcaaaatttaaaattatgcatgcttattagcgagtagttctacagatgtagttaaaaatactaaaacagtttggaggaagaaatgttttcatctagagccctaggatttgacgattaataataataaaaataaaaataaacccctaggatattcgtaatagttcat

引物序列：
F引物        atcggtacttcgcgaatgcgtcgagatGCGGCCGCgaattctttaacatcccgac
R引物        ATGAACTATTACGAATATCCTAGGGGTTTATTTTTATTTTTATTATTATTAATCG
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1楼 2013-10-12 11:11:30
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heroxuning

木虫 (正式写手)
有大神在么，指导一下小弟啊
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2楼2013-10-12 11:28:57
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gyesang

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优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-12 12:22:29
这引物也搞太长了吧，尤其是下游的引物，连续AT，不过既然这样了，你可以先试着跑一个PCR看看
至于PCR程序，要看你用的什么酶，先说下你的PCR反应的酶吧
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-10-12 12:20:29
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heroxuning

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2013-10-12 12:20:29
这引物也搞太长了吧，尤其是下游的引物，连续AT，不过既然这样了，你可以先试着跑一个PCR看看
至于PCR程序，要看你用的什么酶，先说下你的PCR反应的酶吧

扩增速度2Kbp/min，taq酶，大神，我知道的信息止于此
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-12 12:38:18
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