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heroxuning

木虫 (正式写手)

[求助] 紧急求助关于PCR

各位大神,给定目的序列和引物序列,怎样来设计确定PCR程序?小弟在线等,多谢啦模板序列
(目的基因):
atcggtacttcgcgaatgcgtcgagatGCGGCCGCgaattctttaacatcccgactgctaccctttatgagtcccacatttattttatacatgtatttaaggttttaatgggaacaacgtatttggtaaaatgaaaaaaaaaaggattatgagtgtggtacaatattatacatatattaaagttagtaatactagattagtcaagagattgttagtctagatcacttacatttttatgcttacaaattatttaataaagtgcttaaataaaacataaatgtgcatttcatattttacctatgcgagtaattgtataaattcatttgtggcttgattagattatcttcttattcaatctactaattcaccttaatcaccaatcttatgctcatctaaaagacaattcactaatcatcatgttaacacaaagcaattggttaaatacttggttaatcatgataatgagatggatagatgaagatatttaagatcaacataagtacttagaagttcaatagaaaaaaatatatacagtgtattaagaaatctcaagaggttagttcgatctctctaaaacaaatcttagtctcatcattaggtttttaagactatttatagtaaaggctaaaagagtttggttaatatgcaataaaccaaatcaaacccgagacaaaccggtaaccaatataaaatctcataaaattgaggactccatcagtggtgatgaagtcgctatggatgttcggtgctgcccatctgtctacctgataccgctacaattccttcctgccttccatcggtctacgttagcccgctacatatgctcgcttgaaatcttggtaaatctagagtatcatcatcgcagccaacctcatcccactacaaatgcttgctgctgtccatcggtcttgttaaaacattacaaatgcccgatgactcccattgacctacaaaagcccgctgcatctccccttctgcatttcaatgtctttccgatgagtgtgtcgcggttgacacgagcccgctatatgatccttataacgtccattgaccaacatgaaccgctatgactcctccgtgacattcctccttcagcaaatctactcaaatggctccattttgcctcctttgatcaccatttcacccaatcctcttcaagacctataaataccaatgcatatgtaaatatacaactaaaaccctatatgaattatgcaaatgaatcaaaagtgaaacaaaacaagattataaggatggtaaaattgatagatattaataggctattaatgtaaaacacatgatgttttggttcaaacaattcaccgaacaccttccggaataaaattgtctaagtcataaactagcattttaaagctaatctagcattaataccacatatcattaaaagactaaaaattctatttacctttaatctaccattcccaagagtttctaacaaacaaggttgacatttggctaatcatgatttgtaagagaatagttgaaaattttgaaaaggaaaagagatttagtaactgaaaataaataattcatacaagttctctttaaatcttcacaagaggcaaatataattctaaaaatctaatttagaacatcaaaataagatttaaagatataaatagtaaatagatgtgtcatgattcattcgagacaaatcggtttggatccaagcaaagaacttccggagtcacgcatggcagtgagctttggtggtcagttggccaattttcggtggaactactggttaggcatgcataatttgttttttttttttttgtatgaaaactctcaaaatttaaaattatgcatgcttattagcgagtagttctacagatgtagttaaaaatactaaaacagtttggaggaagaaatgttttcatctagagccctaggatttgacgattaataataataaaaataaaaataaacccctaggatattcgtaatagttcat

引物序列:
F引物        atcggtacttcgcgaatgcgtcgagatGCGGCCGCgaattctttaacatcccgac
R引物        ATGAACTATTACGAATATCCTAGGGGTTTATTTTTATTTTTATTATTATTAATCG
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heroxuning

木虫 (正式写手)

有大神在么,指导一下小弟啊
2楼2013-10-12 11:28:57
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-12 12:22:29
这引物也搞太长了吧,尤其是下游的引物,连续AT,不过既然这样了,你可以先试着跑一个PCR看看
至于PCR程序,要看你用的什么酶,先说下你的PCR反应的酶吧
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-10-12 12:20:29
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heroxuning

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2013-10-12 12:20:29
这引物也搞太长了吧,尤其是下游的引物,连续AT,不过既然这样了,你可以先试着跑一个PCR看看
至于PCR程序,要看你用的什么酶,先说下你的PCR反应的酶吧

扩增速度2Kbp/min,taq酶,大神,我知道的信息止于此
4楼2013-10-12 12:38:18
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