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浅歌99

新虫 (初入文坛)

[求助] 建库酶切问题求助!!

建BAC文库时,提取了细胞核DNA然后进行低熔点琼脂糖的包埋,制成了这个包埋块。经过蛋白酶K的处理后,进行了不同浓度Hind III 的酶切,酶切了一个小时,之后跑的脉冲电泳,设置的场强为6V/cm,跑了20个小时。得到的这个结果。两侧的泳道是marker,中间泳道是酶切DNA的结果,设置了Hind III 酶的浓度梯度,从左到右分别为0U 2U 4U 6U 8U 10U。但跑出来基本上没有什么差别。很急,周围没有做这方面的,各位大侠指导一下吧!谢了!!
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gyesang

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引用回帖:
10楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-10-28 09:00:40
能不能把你提细胞核的参考方法发我一份,我参考的是罗美中和Rod.A.Wing的文章。非常感谢...

http://www.nature.com/nprot/jour ... nprot.2011.455.html

nature protocol的文章
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
18楼2013-10-30 22:13:39
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