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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR引物必须与目的基因片段的一小段序列互补吗？急！！！
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pycraze

木虫 (小有名气)

[求助] PCR引物必须与目的基因片段的一小段序列互补吗？急！！！

跑PCR前，设计引物时，引物序列必须是与目的基因片段的一小段序列互补的吗？还是可以在目的基因序列以外设计引物呢?急！！！
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1楼 2013-10-09 22:09:33
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pycraze

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by joan198108 at 2013-10-13 08:48:18
也可以，但是通常会在序列两端加上酶切位点、序列标签等额外序列，这些序列都是非目的基因序列，所以我说是外面...

明白，谢谢咯！
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10楼2013-10-13 09:12:53
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-10 09:56:41
随意啊，只要能扩增到你需要的片段就行了。
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2楼2013-10-09 22:40:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-10 09:56:47
要看你PCR的目的是什么。如果是克隆基因片段，引物的位置是大致固定的，如果是检测样本中是否有目的片段，引物选取的自由度较大，位置比较随意。
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3楼2013-10-10 03:24:59
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pycraze

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-10 03:24:59
要看你PCR的目的是什么。如果是克隆基因片段，引物的位置是大致固定的，如果是检测样本中是否有目的片段，引物选取的自由度较大，位置比较随意。

那如果是克隆基因片段，引物的位置大致固定在哪儿？那要是克隆基因全长呢，引物的位置在哪儿比较好？多谢指教~
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4楼2013-10-10 08:20:00
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