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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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渭水凡夫

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助解读PCR图为什么会这么烂

之前做的都挺不错挺稳定的 回了半个月的家  之后就做不出来了 所有的东西都换新的试了还是不行啊  ,,,,求大侠指点迷津   
体系25ul
buffer  2.5    Dntp  2    F  0.3   R  0.3   模板 0.5 酶  0.5  水补至25ul
求助解读PCR图为什么会这么烂
求指点迷津
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deeplycat

新虫 (初入文坛)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-19 13:47:17
我觉得是你的PCR程序,退火温度设置的太低,你的退火温度一般是你的Tm值减少1--3度(生工),我P的时候就是  退火温度设置的低了 结果条带就弥散了。
8楼2013-09-18 20:33:44
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-18 10:22:24
我感觉你的引物有问题,确定是新的?还有就是你的DNA质量不确定。

[ 发自小木虫客户端 ]
学习使你立于不败之地
2楼2013-09-18 00:58:19
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chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物不好,基本没P出来,都是弥散的
3楼2013-09-18 08:57:12
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-18 10:22:34
个人觉得模板不行,同时退火温度可能有点高!Good luck!
互助互励,共奋共进!!
4楼2013-09-18 09:34:46
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