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well_想太多

新虫 (小有名气)

[求助] 现用PCR p出了一个基因的保守序列,怎么能得到这个基因的整个催化域

我用pcr p出了几丁质酶的保守序列,然后怎么做能得到这个酶基因的整个催化域呢?我是新手,好多不明白的,请高人指教!麻烦详细一点!万分感谢!急等!
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well_想太多

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2013-09-10 01:05:54
用RACE分别网两边做

能具体讲一下吗,因为没做过不是很明白。需要什么仪器和条件?直接用pcr可以直接p出这个酶的整个催化域吗?
3楼2013-09-10 09:06:59
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-10 08:32:21
用RACE分别网两边做

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-09-10 01:05:54
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by well_想太多 at 2013-09-10 09:06:59
能具体讲一下吗,因为没做过不是很明白。需要什么仪器和条件?直接用pcr可以直接p出这个酶的整个催化域吗?...

RACE 分为3'和5'RACE
这个资料网上比较多,你自己查一下吧
4楼2013-09-11 18:39:37
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前夏

新虫 (初入文坛)

我也在克隆这个基因,我做的是菊花的几丁质酶基因,用水杨酸和4℃低温都处理过正常植株,提的RNA,反转录成cDNA后PCR,但就是P不出来,你是怎么P出来的?
5楼2015-07-01 10:24:05
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