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zhaoxinrui0511金虫 (小有名气)
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如何获得含有内含子基因的完整cDNA序列？已有4人参与
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我要扩增的是一个黑曲霉基因（含有两段内含子）的cDNA序列，基因结构是这样的： 1-186是外显子（186 bp） 187-232是内含子 233-313是外显子（81 bp） 314-362是内含子 363-1583是外显子（1221 bp） 之前尝试了分别用PCR扩增三段外显子，再用融合PCR的方法连接，但由于前两个外显子片段太短而失败了， 请问有其他什么好办法吗？ |
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2楼2014-06-22 08:42:49
这是马甲
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谁的马甲都不是
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就按照你之前融合PCR的作法 第一段可以用引物扩出来 第二段合成两条长引物相互退火延伸就行 再将前两段先融合 最后剩下的就好办了吧 但是这样步骤比较多 费事 要是有钱干脆买个反转录试剂盒 [ 发自小木虫客户端 ] |
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zhaoxinrui051114楼2014-06-23 00:30:39
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应用NCBI查找连续的mRNA(含内含子)、cDNA、蛋白序列 http://www.doc88.com/p-676405989477.html |
10楼2014-06-22 16:30:39