24小时热门版块排行榜    

查看: 1810  |  回复: 5

547star

木虫 (著名写手)

[求助] 如何插入内含子到目的基因?

虽然分析序列的时候知道各种内含子,但想挪一个过来插入到另一个基因的时候要按照什么原则,完全不懂,生怕mRNA不能剪切好,得不到目的蛋白。请路过的大侠出手指点一二。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

为什么
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
547star: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢!!! 2013-08-05 00:41:20
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-05 13:30:56
我理解的是你要把基因Y的某个内含子放在基因X里面. 内含子注意两端的序列就行了, 多半是GT开始, AG结束.
如果基因X本来就有内含子的话你可以替换的办法. 如果一定要放在某个exon的里面....请有经验虫子出来帮忙
2楼2013-08-04 23:12:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sthunder

木虫 (正式写手)

能告知你插入内含子的目的吗?
互助互励,共奋共进!!
3楼2013-08-05 04:38:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-05 04:38:48
能告知你插入内含子的目的吗?

避免克隆过程中在大肠杆菌表达等。
为什么
4楼2013-08-05 07:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-05 13:31:16
引用回帖:
4楼: Originally posted by 547star at 2013-08-05 07:55:24
避免克隆过程中在大肠杆菌表达等。...

你是在植物中表达?那样的话就没意义了哈,因为植物启动子在e.coli中是不会启动的,其次,如果你的启动子在e.coli中能被启动的话,你插入exon也没有用,它也会表达出一个蛋白来。最重要的是,如果你有其他特殊目的的话,必须要个exon,你为什么不在gDNA上P呢,这样的话,不就直接得到一个含exon的序列。再说,如果你只想要某一个exon的话,也可以分段PCR,含exon部分用gDNA为模板,其他部分用cDNA为模板,然后两端做个重叠PCR就OK了!
互助互励,共奋共进!!
5楼2013-08-05 09:16:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-05 09:16:45
你是在植物中表达?那样的话就没意义了哈,因为植物启动子在e.coli中是不会启动的,其次,如果你的启动子在e.coli中能被启动的话,你插入exon也没有用,它也会表达出一个蛋白来。最重要的是,如果你有其他特殊目的 ...

。至于你肯定的事情,我不认同,首先表达的蛋白不会相同,内含子有终止密码子的会提前终止翻译,插入内含子也会影响读码框,我的目的基因本来就没有内含子。
如果可以,请针对我1楼的问题回答。
为什么
6楼2013-08-05 10:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 547star 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +9 zju2000 2026-09-26 12/600 2026-09-30 09:48 by ckxbear
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +4 tianxiaoxian 2026-09-28 7/350 2026-09-30 08:34 by 88817753
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见