[交流] 【求助/交流】诚心请教一个关于拟南芥突变体鉴定的问题已有8人参与

Originally posted by liucaifeng at 2011-04-07 20:36:30:
订的SALK库的拟南芥T-DNA插入突变体，DNA水平鉴定有纯合子，但RNA水平鉴定目的基因却仍能表达，几个Line 都是这样，快郁闷了。不知道大家有碰到过类似情况，可能是什么愿意导致的呢？

Originally posted by 咸鱼 at 2011-04-10 13:06:53:
RNA水平鉴定就是做RT或者NOrthern吧，这样的话你选择做PCR的那一段引物或Northern的那一段探针是T-DNA插入之前还是之后的序列？

Originally posted by liucaifeng at 2011-04-11 10:11:45:
做RT，PCR引物设计的还是跨T-DNA的，按理说不该P出来的，可就是能P吃条带来，测序结果也表明的确是目的条带

7楼: Originally posted by xiemin217 at 2011-10-31 10:48:57:
其实，这个问题很正常，见到的人很多，原因不清楚，买突变体的时候要多把所有的基因的LINE全买了就好了，要是都这样的话，恭喜你了，做RNAi吧。

8楼: Originally posted by liucaifeng at 2011-10-31 19:26:49:
我基本上把全部能订的line都订了鉴定，不管插外显子还是内含子上的，结果都是这种情况，问过好多人都没见过这种情况，甚至都不相信。你真的也碰到够这种情况吗，是不是与基因有关呢？

9楼: Originally posted by xiemin217 at 2011-11-01 10:13:58:
我自己就碰过呀，我问过北清中，他们都有见过，国外也是，这个不好办，你用纯和和杂合都做个鉴定看下，如果看表型的话就先验证下表型，可以的话先做下去，再做RNAi了。