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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】诚心请教一个关于拟南芥突变体鉴定的问题
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叶寻

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jhu132llh(金币+2): good,鼓励热心虫友积极参与讨论 2011-11-07 18:04:25
引用回帖:
9楼: Originally posted by xiemin217 at 2011-11-01 10:13:58:
我自己就碰过呀，我问过北清中，他们都有见过，国外也是，这个不好办，你用纯和和杂合都做个鉴定看下，如果看表型的话就先验证下表型，可以的话先做下去，再做RNAi了。

请问一下呀？我的重新设计引物后，RT-PCR结果，突变体的目的条带明显比野生型的弱，这样是不是可以继续。或者还需要什么进一步的验证吗？
  多谢指教！
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11楼2011-11-06 14:35:44
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liucaifeng

金虫 (小有名气)
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jhu132llh(金币+2): good,鼓励热心虫友积极参与讨论 2011-11-07 18:04:35
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11楼: Originally posted by 叶寻 at 2011-11-06 14:35:44:
请问一下呀？我的重新设计引物后，RT-PCR结果，突变体的目的条带明显比野生型的弱，这样是不是可以继续。或者还需要什么进一步的验证吗？
  多谢指教！

你的突变体T-DNA是插在启动子还是基因的外显子或内含子啊？我的一个插在外显子，也是鉴定结果目的基因表达较弱，不知道怎么解释
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12楼2011-11-07 15:47:12
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叶寻

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jhu132llh(金币+2): 鼓励交流 2011-11-09 16:23:37
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12楼: Originally posted by liucaifeng at 2011-11-07 15:47:12:
你的突变体T-DNA是插在启动子还是基因的外显子或内含子啊？我的一个插在外显子，也是鉴定结果目的基因表达较弱，不知道怎么解释

我的插在启动子区域，离起始密码子比较近的
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13楼2011-11-07 22:50:37
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liucaifeng

金虫 (小有名气)
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jhu132llh(金币+2): good,感谢积极应助 2011-11-09 16:23:43
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13楼: Originally posted by 叶寻 at 2011-11-07 22:50:37:
我的插在启动子区域，离起始密码子比较近的

插在启动子区的话基因下调蛮正常的，可以接着往下做吧
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14楼2011-11-08 08:29:45
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272401213

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YNWA
15楼2012-04-02 09:08:49
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xiemin217

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1225921楼: Originally posted by 叶寻 at 2011-11-07 22:50:37:
我的插在启动子区域，离起始密码子比较近的

插在启动子区域，基因表达有三种情况：高、平、低，你要做些分析才可以，一般见到多的是比原来的低，你可以看下蛋白水平，这个有说服力。
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16楼2012-04-04 10:02:00
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leilaxx

金虫 (小有名气)
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楼主前辈。请问能请教你一些关于T-DNA突变体的鉴定的问题吗？
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17楼2014-07-19 15:58:36
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刘瑞君

新虫 (初入文坛)
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楼楼 您好，我最近也遇到类似问题 能互相交流一下吗
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18楼2015-11-30 14:01:02
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