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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 如何插入内含子到目的基因？
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547star

木虫 (著名写手)

[求助] 如何插入内含子到目的基因？

虽然分析序列的时候知道各种内含子，但想挪一个过来插入到另一个基因的时候要按照什么原则，完全不懂，生怕mRNA不能剪切好，得不到目的蛋白。请路过的大侠出手指点一二。
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为什么
1楼 2013-08-04 15:58:06
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547star

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-05 04:38:48
能告知你插入内含子的目的吗？

避免克隆过程中在大肠杆菌表达等。
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为什么
4楼2013-08-05 07:55:24
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547star

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-05 09:16:45
你是在植物中表达？那样的话就没意义了哈，因为植物启动子在e.coli中是不会启动的，其次，如果你的启动子在e.coli中能被启动的话，你插入exon也没有用，它也会表达出一个蛋白来。最重要的是，如果你有其他特殊目的 ...

。至于你肯定的事情，我不认同，首先表达的蛋白不会相同，内含子有终止密码子的会提前终止翻译，插入内含子也会影响读码框，我的目的基因本来就没有内含子。
如果可以，请针对我1楼的问题回答。
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为什么
6楼2013-08-05 10:52:04
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