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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 有什么方法把外源DNA插入到细菌的基因组上
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)

[求助] 有什么方法把外源DNA插入到细菌的基因组上 已有1人参与

有什么方法把外源DNA插入到细菌的基因组上？
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1楼 2012-02-21 19:27:09
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)
就像构建BL21之类的表达菌株，都是用什么方法把外源基因插入到细菌的基因组上的，谁知道？有没有这方面的专家？大牛？
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2楼2012-02-22 10:47:59
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

【答案】应助回帖

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准确来说，你表述的有点出入。
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好好做事，踏实做人！
3楼2012-02-22 10:49:21
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

【答案】应助回帖

因为BL21是一种表达宿主菌，它主要是通过质粒表达外源蛋白。也就是外源蛋白克隆进入表达质粒，之后转化入BL21，表达蛋白。
他不是插入到细菌基因组里面去的。
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好好做事，踏实做人！
4楼2012-02-22 10:52:05
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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转座子？双交换？
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5楼2012-02-22 12:01:35
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)
呵呵，我没表达清楚啊

我需要的是：能把外源基因整合到基因组上的方法,例如T7 RNA 聚合酶基因整合到细菌基因组上，从而形成BL21菌株（当然还有敲出蛋白酶等步骤）。
这是通过什么技术实现的？
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6楼2012-02-22 15:28:03
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shiliu2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我想是不是可以利用插入突变的方法。将外源基因作为基因组中某一基因的插入片段，先构建载体，再转入细胞，最后通过基因重组互换，把含有外源片段的基因替换上去。只是想法，还不成熟，见笑了。
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7楼2012-02-22 16:01:56
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做过，不好做，不一定能达到你想要的结果，效果不是很好，你做什么军的突变呀？
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我选择，我喜欢；我喜欢我的选择。
8楼2012-02-22 19:06:11
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)
农杆菌，改造，想插入一个基因，看来路漫漫其修远兮
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9楼2012-02-22 19:26:25
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念秋

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我不确定是不是懂了楼主的意思 但是 如果用 同源重组（基因靶定）的方法 就可以将外源基因整合到基因组上了
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10楼2012-02-22 19:43:42
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