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如何插入内含子到目的基因?
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如何插入内含子到目的基因?
虽然分析序列的时候知道各种内含子,但想挪一个过来插入到另一个基因的时候要按照什么原则,完全不懂,生怕mRNA不能剪切好,得不到目的蛋白。请路过的大侠出手指点一二。
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1楼
2013-08-04 15:58:06
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5楼
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Originally posted by
Sthunder
at 2013-08-05 09:16:45
你是在植物中表达?那样的话就没意义了哈,因为植物启动子在e.coli中是不会启动的,其次,如果你的启动子在e.coli中能被启动的话,你插入exon也没有用,它也会表达出一个蛋白来。最重要的是,如果你有其他特殊目的 ...
。至于你肯定的事情,我不认同,首先表达的蛋白不会相同,内含子有终止密码子的会提前终止翻译,插入内含子也会影响读码框,我的目的基因本来就没有内含子。
如果可以,请针对我1楼的问题回答。
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为什么
6楼
2013-08-05 10:52:04
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【答案】应助回帖
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很有帮助, 谢谢!!!
2013-08-05 00:41:20
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助!
2013-08-05 13:30:56
我理解的是你要把基因Y的某个内含子放在基因X里面. 内含子注意两端的序列就行了, 多半是GT开始, AG结束.
如果基因X本来就有内含子的话你可以替换的办法. 如果一定要放在某个exon的里面....请有经验虫子出来帮忙
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2楼
2013-08-04 23:12:39
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能告知你插入内含子的目的吗?
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3楼
2013-08-05 04:38:48
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3楼
:
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Sthunder
at 2013-08-05 04:38:48
能告知你插入内含子的目的吗?
避免克隆过程中在大肠杆菌表达等。
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4楼
2013-08-05 07:55:24
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