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zhaoxinrui0511金虫 (小有名气)
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[求助]
如何获得含有内含子基因的完整cDNA序列？ 已有4人参与
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我要扩增的是一个黑曲霉基因（含有两段内含子）的cDNA序列，基因结构是这样的： 1-186是外显子（186 bp） 187-232是内含子 233-313是外显子（81 bp） 314-362是内含子 363-1583是外显子（1221 bp） 之前尝试了分别用PCR扩增三段外显子，再用融合PCR的方法连接，但由于前两个外显子片段太短而失败了， 请问有其他什么好办法吗？ |
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cm8002
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 21:41:54
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 21:41:54
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就按照你之前融合PCR的作法 第一段可以用引物扩出来 第二段合成两条长引物相互退火延伸就行 再将前两段先融合 最后剩下的就好办了吧 但是这样步骤比较多 费事 要是有钱干脆买个反转录试剂盒 [ 发自小木虫客户端 ] |
zhaoxinrui051114楼2014-06-23 00:30:39
lone007
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2楼2014-06-22 08:42:49
liuderong
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3楼2014-06-22 09:35:36
这是马甲
至尊木虫 (著名写手)
谁的马甲都不是
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4楼2014-06-22 09:56:42
