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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 现用PCR p出了一个基因的保守序列，怎么能得到这个基因的整个催化域
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well_想太多

新虫 (小有名气)

[求助] 现用PCR p出了一个基因的保守序列，怎么能得到这个基因的整个催化域

我用pcr p出了几丁质酶的保守序列，然后怎么做能得到这个酶基因的整个催化域呢？我是新手，好多不明白的，请高人指教！麻烦详细一点！万分感谢！急等！
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1楼2013-09-09 21:02:09
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-10 08:32:21
用RACE分别网两边做

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-09-10 01:05:54
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well_想太多

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2013-09-10 01:05:54
用RACE分别网两边做

能具体讲一下吗，因为没做过不是很明白。需要什么仪器和条件？直接用pcr可以直接p出这个酶的整个催化域吗？
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3楼2013-09-10 09:06:59
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by well_想太多 at 2013-09-10 09:06:59
能具体讲一下吗，因为没做过不是很明白。需要什么仪器和条件？直接用pcr可以直接p出这个酶的整个催化域吗？...

RACE 分为3'和5'RACE
这个资料网上比较多，你自己查一下吧
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4楼2013-09-11 18:39:37
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前夏

新虫 (初入文坛)
我也在克隆这个基因，我做的是菊花的几丁质酶基因，用水杨酸和4℃低温都处理过正常植株，提的RNA,反转录成cDNA后PCR,但就是P不出来，你是怎么P出来的？
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5楼2015-07-01 10:24:05
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