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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yanshuai511

铜虫 (小有名气)

[求助] 急!500kD 蛋白western 求助

最近在做血浆中apoB的western,大小是520kD,浓缩胶5%,分离胶7% (150V,5h),感觉分的还可以,可转膜(350mA,5h)老是有问题。压出来的条带也不是很好看。有没有人做过的,求指导一下?
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erlei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大蛋白比较难转,你可以尝试一下降低电压或电流,如果你的老板有钱的话可以买一台转膜机
5楼2013-09-05 07:59:19
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查看全部 18 个回答

yanshuai511

铜虫 (小有名气)

急啊,没人做过吗?
2楼2013-09-04 22:00:25
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忽而今秋

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是转过了还是?做个预实验看看试试电压和时间。可以适当提高甲醇浓度。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2013-09-05 00:12:41
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在转膜液里加SDS可以帮助大蛋白转膜。此外条带不好看可能是变性不完全造成的,大蛋白变性比较困难,可以适当延长变性时间。
4楼2013-09-05 01:40:38
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