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急!500kD 蛋白western 求助
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yanshuai511
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[
求助
]
急!500kD 蛋白western 求助
最近在做血浆中apoB的western,大小是520kD,浓缩胶5%,分离胶7% (150V,5h),感觉分的还可以,可转膜(350mA,5h)老是有问题。压出来的条带也不是很好看。有没有人做过的,求指导一下?
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1楼
2013-09-04 20:13:19
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erlei
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大蛋白比较难转,你可以尝试一下降低电压或电流,如果你的老板有钱的话可以买一台转膜机
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5楼
2013-09-05 07:59:19
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yanshuai511
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急啊,没人做过吗?
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2楼
2013-09-04 22:00:25
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忽而今秋
铜虫
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专业: 肿瘤病因
【答案】应助回帖
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你是转过了还是?做个预实验看看试试电压和时间。可以适当提高甲醇浓度。
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3楼
2013-09-05 00:12:41
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cicelyzh
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在转膜液里加SDS可以帮助大蛋白转膜。此外条带不好看可能是变性不完全造成的,大蛋白变性比较困难,可以适当延长变性时间。
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4楼
2013-09-05 01:40:38
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