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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western蛋白样品为什么要煮沸再冰浴
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树懒

银虫 (小有名气)

[交流] western蛋白样品为什么要煮沸再冰浴 已有3人参与

如题，谢谢大家了
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1楼 2009-10-14 20:40:18
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
amisking(金币+1,VIP+0): 10-14 21:35
去除亚稳态结构
充分变性
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2楼2009-10-14 20:51:01
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树懒

银虫 (小有名气)
能不能说的详细一点。
亚稳态是指有向平衡态的趋势，但是要过渡到平衡态需要克服一定的壁垒吧
为什么冰浴可以去除亚稳态结构呢
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3楼2009-10-14 21:26:25
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
树懒(金币+5,VIP+0):谢谢哦，但是分子自由能最低的情况不就是正确折叠的情况么 10-15 10:16
呃……已经站内了
主要是加热后骤冷能够使得分子取自由能最低的构象，避免形成亚稳态复合物
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4楼2009-10-14 23:53:04
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
树懒(金币+1,VIP+0):很拉风，我也不是很明白为什么要冰浴 10-15 10:18
我们好像从来不冰浴的
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5楼2009-10-15 08:10:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
树懒(金币+2,VIP+0):这会真的明白了 谢谢 10-15 20:36
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009/10/14, 23:53:
呃……已经站内了
主要是加热后骤冷能够使得分子取自由能最低的构象，避免形成亚稳态复合物

re一下
因为加了去垢剂和还原剂，加上加热，蛋白质已经充分变性，同时亚基解聚
但是这些变形蛋白仍有可能在低温或者温度缓慢变化的情况下发生聚集，如果直接跑电泳可能会出问题，所以要加热把这些不稳定的聚集给打散，同时骤冷防止缓慢降温的过程中发生再次聚集
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6楼2009-10-15 10:33:18
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zeqyanyan

金虫 (小有名气)
★ ★
树懒(金币+2,VIP+0):很感谢你的说明。只剩下两个了，^_^ 10-15 20:37
我就从你的问题出发给你说点原因，不过楼上说的是有道理的。首先你煮沸它就是让它变性，消除一些亚基的影响，如若不进行冰浴那么结果就是在蛋白自然降温时就非常有可能复性，这样与不加热就没什么区别了。
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7楼2009-10-15 10:46:12
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van_der

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
太棒了。
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8楼2010-05-19 21:54:15
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296595127

铜虫 (初入文坛)
学习啦，谢谢虫友们
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9楼2012-04-26 22:49:34
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logic2020

禁虫
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10楼2021-12-11 18:35:05
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