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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western蛋白样品为什么要煮沸再冰浴
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树懒

银虫 (小有名气)

[交流] western蛋白样品为什么要煮沸再冰浴 已有3人参与

如题，谢谢大家了
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1楼 2009-10-14 20:40:18
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
树懒(金币+2,VIP+0):这会真的明白了 谢谢 10-15 20:36
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009/10/14, 23:53:
呃……已经站内了
主要是加热后骤冷能够使得分子取自由能最低的构象，避免形成亚稳态复合物

re一下
因为加了去垢剂和还原剂，加上加热，蛋白质已经充分变性，同时亚基解聚
但是这些变形蛋白仍有可能在低温或者温度缓慢变化的情况下发生聚集，如果直接跑电泳可能会出问题，所以要加热把这些不稳定的聚集给打散，同时骤冷防止缓慢降温的过程中发生再次聚集
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6楼2009-10-15 10:33:18
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
amisking(金币+1,VIP+0): 10-14 21:35
去除亚稳态结构
充分变性
赞一下(20人) 回复此楼
2楼2009-10-14 20:51:01
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树懒

银虫 (小有名气)
能不能说的详细一点。
亚稳态是指有向平衡态的趋势，但是要过渡到平衡态需要克服一定的壁垒吧
为什么冰浴可以去除亚稳态结构呢
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3楼2009-10-14 21:26:25
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
树懒(金币+5,VIP+0):谢谢哦，但是分子自由能最低的情况不就是正确折叠的情况么 10-15 10:16
呃……已经站内了
主要是加热后骤冷能够使得分子取自由能最低的构象，避免形成亚稳态复合物
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2009-10-14 23:53:04
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