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荧光定量PCR 结果出来 内参和目的基因的ct 都相差不大 可能原因有哪些？
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第一：抽提了几次RNA, 结果都是这样，理论上 内参CT应该比目的CT 少,至少两个循环吧？ 第二:我抽提的RNA 测浓度为359.9ng/微升,A260/A280为2.08，这结果应该表明我抽提的RNA 没怎么降解 和DNA污染吧？ 第三： 我用了TAKALA 的PrimeScritpt RT reagent Kit writh gDNA Eraser 的反转录试剂盒，加入Total RNA 量是1/0.3599=2.778微升的RNA抽提液，使其终浓度为1ng/ul,(符合试剂盒要求的：20ul反转录反应体系中，SYBR染色PCR法最多可使用1ug的Total RNA) 这一步也没错的话，那应该说我抽提的RNA 没什么问题吧？ 最后结果是：为什么定量结果如题目所说的那样的呢？ 另外荧光出来的扩增曲线 都是单峰 |
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