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atous

新虫 (初入文坛)

[交流] 溶解曲线,重复性不好 已有2人参与

相对定量PCR中,我将同一样本同一指标重复3次,可得到的溶解曲线并不一致,且多数有双峰,求指导
溶解曲线,重复性不好
ALDHA3,P4-2.jpg


溶解曲线,重复性不好-1
ALDHA3,P4-2.jpg


溶解曲线,重复性不好-2
ALDHA3,7404H2.jpg
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-08-25 16:31:16
引物特异性问题或者是RNA样品中有gDNA。
2楼2013-08-25 12:51:55
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necilyx

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-26 18:35:42
这应该明显的非特异性扩增,重新做一次模版,试试提高些退火温度或者增加Mg离子浓度,还不行就只能重新设计引物了。。
聪明才智要为意外做准备~~
3楼2013-08-26 16:28:49
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