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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 溶解曲线问题
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ann花开花落

铜虫 (正式写手)

[求助] 溶解曲线问题

请问DNA体系和RNA体系做溶解曲线时，熔解曲线均时好时坏的，如图1和2是RNA体系做的，一次这样，一次又那样的，请问怎么回事啊
溶解曲线问题
图片2.png


溶解曲线问题-1
图片1.png
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1楼 2013-08-22 10:24:47
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
这啥呀?看不懂....
横坐标是温度,纵坐标是260nm吸收吗?
怎么还降下去了?
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2013-08-22 10:34:31
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-22 16:27:02
real-time PCR? 先考虑样品因素，RNA样品表达变化比较大，而且易降解（逆转录的方法，引物特异性）。另外模板的丰度也很重要（太低就不能保证PCR的准确性了）。引物设计和PCR条件（两步法的话换三步法试试）高Tm值可能是DNA污染，适当减少延伸时间。
你说的再具体些。
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3楼2013-08-22 15:11:03
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