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ann花开花落

铜虫 (正式写手)

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[求助] 溶解曲线问题

请问DNA体系和RNA体系做溶解曲线时，熔解曲线均时好时坏的，如图1和2是RNA体系做的，一次这样，一次又那样的，请问怎么回事啊

图片2.png

图片1.png

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1楼2013-08-22 10:24:47

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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

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这啥呀?看不懂....
横坐标是温度,纵坐标是260nm吸收吗?
怎么还降下去了?

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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.

2楼2013-08-22 10:34:31

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hl16010921

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-22 16:27:02

real-time PCR? 先考虑样品因素，RNA样品表达变化比较大，而且易降解（逆转录的方法，引物特异性）。另外模板的丰度也很重要（太低就不能保证PCR的准确性了）。引物设计和PCR条件（两步法的话换三步法试试）高Tm值可能是DNA污染，适当减少延伸时间。
你说的再具体些。

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3楼2013-08-22 15:11:03

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