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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » T载体连接不上去
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fanwq258

木虫 (正式写手)

[交流] T载体连接不上去

自己扩增的基因，连接T载体就是连不上，但是买载体时带的插入片段可以连接上，这可该怎么办呢？
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1楼 2013-08-05 09:53:35
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flyhigh805

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by fanwq258 at 2013-08-05 18:43:10
我的目的片段也就是800多，浓度在25ng/UL左右，买载体是带的片段也就700多bp，浓度是50ng/UL，我就是按照自带片段的浓度加的，可是就是连接不上...

建议按照我上面所说的方法提高目的片段的浓度
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18楼2013-08-10 17:03:35
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你是什么酶扩出来的片段，如果是高保真酶的话，你考虑加A尾了吗？
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2楼2013-08-05 13:35:34
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-08-05 13:35:34
你是什么酶扩出来的片段，如果是高保真酶的话，你考虑加A尾了吗？

不是高保真的酶，用的就是宝生物普通的ex taq
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3楼2013-08-05 14:51:24
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hyphen007

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
考虑下连接条件、片段大小及各种成分的量
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4楼2013-08-05 15:24:40
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